AMPK基因在2型糖尿病發(fā)病中的作用.pdf

1、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)是一種調(diào)節(jié)細(xì)胞能量供應(yīng)的代謝酶,也被稱為“能量感受器”。為研究AMPK基因?qū)ρ茄x及相關(guān)作用機(jī)制的影響,探討AMPK基因在2型糖尿病發(fā)病中的作用,我們分別取3-5周齡AMPK轉(zhuǎn)基因小鼠(AMPK-TG),AMPK基因敲除小鼠(AMPK-KO)和野生型對(duì)照(wild type,WT)C57BL/6J小鼠各24只,分為正常飼料(ND)喂養(yǎng)和高糖高脂飼料(HFD)喂養(yǎng)組,每?jī)芍軠y(cè)定小鼠隨機(jī)血糖和禁食4小時(shí)血

2、糖(4hBG),每4周測(cè)定小鼠腹腔注射糖耐量實(shí)驗(yàn)(IPGTT),喂養(yǎng)12周后,解剖取樣,檢測(cè)樣本血生化指標(biāo),以及與糖脂代謝相關(guān)的酶活性和相關(guān)的信號(hào)蛋白表達(dá)。
　　 隨機(jī)血糖、空腹4小時(shí)血糖和糖耐量測(cè)定實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,正常飼料(ND)和高糖高脂飼料(HFD)喂養(yǎng),AMPK-KO小鼠的血糖值總體趨勢(shì)都高于WT小鼠(P<0.05),尤其HFD喂養(yǎng)更為明顯；AMPK-TG小鼠的血糖值總體趨勢(shì)都低于WT小鼠(P<0.05)。血生化檢測(cè)指標(biāo)顯

3、示,正常飼料喂養(yǎng)情況下,AMPK-KO小鼠的血糖含量、甘油三酯(TG)、總膽固醇(CHO1)含量、低密度脂蛋白(LDL)含量、糖化血清蛋白(GSP)、糖化血紅蛋白(HbAlc)含量明顯高于對(duì)照組,高密度脂蛋白含量(HDL)、胰島素、C肽含量均低于對(duì)照小鼠(P<0.05)。AMPK-TG小鼠血糖含量、高密度脂蛋白(HDL)含量均低于WT對(duì)照組(P<0.05)；甘油三酯(TG)、糖化血紅蛋白(HbAlc)、C肽含量高于WT對(duì)照組(P<0.0

4、5)。高糖高脂飼料喂養(yǎng)后,模型小鼠和對(duì)照組小鼠血生化指標(biāo)進(jìn)一步升高或降低,差異加大。
　　 酶活性實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,正常飼料喂養(yǎng)情況下,AMPK-KO小鼠的糖原合成酶激酶(GsK)活性明顯高于WT對(duì)照組(P<0.05)；其肝糖原、肌糖原含量,肝脂酶(HL)、脂蛋白脂酶(LPL)、總脂酶活性,6-磷酸葡萄糖脫氫酶(G-6-PD)活性和葡萄糖激酶(GK)活性低于對(duì)照組(P<0.05)。AMPK-TG小鼠肝糖原含量、脂蛋白脂酶(LPL)、

5、總脂酶活性和葡萄糖激酶(GK)活性高于WT對(duì)照組(P<0.05)；6-磷酸葡萄糖脫氫酶(G-6-PD)、糖原合成酶激酶(GsK)活性低于對(duì)照組(P<0.05)。高糖高脂飼料喂養(yǎng)后,模型小鼠和對(duì)照組小鼠酶活性指標(biāo)進(jìn)一步升高或降低,差異加大。
　　 蛋白表達(dá)結(jié)果顯示,AMPK-KO小鼠肝臟PPARγ蛋白表達(dá)量明顯高于對(duì)照組(P<0.05),肝組織P-AMPK蛋白、GLUT-4蛋白的表達(dá)量低于對(duì)照組(P<0.05)。
　　 以