多囊卵巢綜合征患者著床窗口期子宮內(nèi)膜VEGF、MIF的表達及意義.pdf

1、多囊卵巢綜合征（polycystic ovarian syndrome，PCOS）是內(nèi)分泌和代謝功能紊亂性疾病，是無排卵型不孕癥的最主要原因，目前針對PCOS患者，經(jīng)內(nèi)分泌和代謝紊亂糾正后可恢復(fù)正常排卵，但卻存在妊娠率低，流產(chǎn)率高的現(xiàn)象，是目前國內(nèi)外生殖內(nèi)分泌研究的熱點和難點之一，多數(shù)學(xué)者認為可能與患者體內(nèi)長期激素失調(diào)引起的子宮內(nèi)膜對胚胎的容受性降低有關(guān)。
　　 胚胎著床和生長發(fā)育需要子宮內(nèi)膜和胚胎同步發(fā)育，一般認為子宮內(nèi)膜允許

2、胚胎著床的短暫時期是排卵后的7-8天（即月經(jīng)周期的第21-22天），這一時期被稱為種植“窗口期”。研究認為胚胎著床存在粘附、侵入、胎盤形成三個階段，任何一個環(huán)節(jié)出現(xiàn)差錯將導(dǎo)致胚胎無法順利著床，引起不良妊娠結(jié)局。既往研究認為：整合素主要作用于胚泡與子宮內(nèi)膜的粘附過程;基質(zhì)金屬蛋白酶可降解子宮內(nèi)膜細胞外基質(zhì)從而使胚泡侵入著床點的子宮內(nèi)膜；白血病抑制因子在著床期子宮內(nèi)膜中特異性表達。以上均被認為是子宮內(nèi)膜容受性的標志物。但是，目前尚無公認的確

3、切的子宮內(nèi)膜容受性的標志物。
　　 血管內(nèi)皮生長因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）是1989年Ferrara等從牛腦垂體濾泡星形細胞的體外培養(yǎng)液中分離純化到的一種蛋白質(zhì)，在人和動物的肝、腦、腎、肺、脾和垂體、骨骼、卵巢等組織中廣泛分布，屬于肝素結(jié)合蛋白家族。VEGF與其受體結(jié)合后，誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細胞的分裂、增殖，促使內(nèi)皮細胞遷移，增強毛細血管通透性，使血漿外滲，有利于大量新生血管

4、以出芽的方式形成；其又可使非內(nèi)皮細胞分泌VEGF，再通過旁分泌的機制作用于其它細胞。VEGF在整個月經(jīng)周期子宮內(nèi)膜均有表達，且呈周期依賴性改變，著床窗口期VEGF可能通過增加胚泡植入部位血管的通透性和子宮內(nèi)膜的容受性來影響植入，與胎盤血管的形成關(guān)系密切。一方面，VEGF又稱為血管通透性因子，其使在植入前期就開始擴張的子宮內(nèi)膜血管系統(tǒng)在植入后擴張更加顯著，血管通透性增強，為植入做好準備。
　　 巨噬細胞移動抑制因子（macroph

5、age migration inhibitory factor，MIF）是集細胞因子、酶、神經(jīng)內(nèi)分泌激素特性于一身的多效能蛋白分子，廣泛參與炎癥、腫瘤形成、細胞增殖和免疫應(yīng)答等過程。研究認為在正常人子宮內(nèi)膜組織中，MIF在子宮內(nèi)膜的表達呈周期依賴性，可上調(diào)整合素和VEGF在子宮內(nèi)膜的表達，也可能與其他細胞因子間存在相互調(diào)節(jié)的關(guān)系，從而影響子宮內(nèi)膜容受性，在胚胎植入中可能起著積極的作用。
　　 MIF、VEGF的表達與子宮內(nèi)膜容受

6、性有密切的關(guān)系，本課題將應(yīng)用免疫組化的方法測定PCOS患者窗口期子宮內(nèi)膜MIF、VEGF的表達，并分析兩者之間的相關(guān)性，探討MIF、VEGF的表達與PCOS患者內(nèi)分泌紊亂糾正后仍出現(xiàn)低妊娠率高流產(chǎn)率的可能作用機制。
　　 目的：
　　 1研究PCOS組及對照組著床窗口期子宮內(nèi)膜組織中VEGF、MIF的表達。探討VEGF、MIF與PCOS患者內(nèi)分泌紊亂糾正后子宮內(nèi)膜容受性的相關(guān)性。
　　 2探討VEGF、MIF與P

7、COS患者內(nèi)分泌紊亂糾正后妊娠率低、流產(chǎn)率高的可能作用機制。
　　 材料與方法：
　　 1研究對象及分組
　　 PCOS組：10例為2009年11月至2010年6月在鄭州大學(xué)第三附屬醫(yī)院婦科門診就診的已婚PCOS患者，年齡25～35歲，平均年齡(27.80±1.87)歲。納入標準：PCOS診斷符合2003年鹿特丹修正的診斷標準：①稀發(fā)排卵或無排卵；②高雄激素的臨床表現(xiàn)和（或）高雄激素血癥；③超聲表現(xiàn)為多囊卵巢[一

8、側(cè)或雙側(cè)卵巢有12個以上直徑2～9mm的卵泡和（或）卵巢體積＞10ml];上述3條中符合2條，并排除其他疾?。鐜煨谰C合征、先天性腎上腺皮質(zhì)增生癥、分泌雄激素的腫瘤等。經(jīng)治療3～9個月后，基礎(chǔ)內(nèi)分泌測定正常，月經(jīng)規(guī)則，自然周期排卵或使用促排卵治療后可正常排卵；陰道B超未發(fā)現(xiàn)子宮及卵巢有器質(zhì)性病變存在，不合并子宮內(nèi)膜異位癥；丈夫精液檢查正常。
　　 對照組：11例為同期因男方因素或輸卵管因素就診的不孕癥患者，年齡25～35歲，平均

9、年齡（29．o±2.79）歲。納入標準：月經(jīng)規(guī)律，排卵正常；基礎(chǔ)內(nèi)分泌測定正常；陰道B超未發(fā)現(xiàn)子宮及卵巢有器質(zhì)性病變存在，不合并子宮內(nèi)膜異位癥；近3個月未用過激素類藥物。
　　 PCOS組與對照組標本的收集均得到患者的知情同意。
　　 2標本收集和實驗方法
　　 PCOS組與對照組均于排卵后7～8天取空腹靜脈血，測定血清人絨毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin，HCG)濃度，H

10、CG＜30IU/L認為本次無妊娠可能。取靜脈血確認HCG＜30IU/L當日用一次性子宮內(nèi)膜吸管進行子宮內(nèi)膜取材，所取新鮮內(nèi)膜組織用10％甲醛固定6-24h后，常規(guī)脫水，石蠟包埋，每個標本作4mm連續(xù)切片。切片后至60℃烤箱2h，常規(guī)HE染色，觀察所取子宮內(nèi)膜的組織學(xué)形態(tài)。載玻片涂防脫片劑多聚賴氨酸，經(jīng)過脫蠟、水化、微波抗原修復(fù)等，采用免疫組化法進行定性及半定量測定子宮內(nèi)膜組織中MIF、VEGF的表達情況。
　　 3統(tǒng)計學(xué)分析

11、r>　　 采用SPSS17.0統(tǒng)計分析軟件，數(shù)據(jù)分析采用t檢驗和pearson相關(guān)性分析，分類變量資料樣本率的比較采用Fisher's確切概率法，P＜0.05為有顯著性差異。
　　 結(jié)果：
　　 1研究對象一般情況比較：PCOS組和對照組相比，年齡差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.01)。
　　 2 PCOS組及對照組子宮內(nèi)膜病理結(jié)果比較：PCOS組分泌期子宮內(nèi)膜中，分泌反應(yīng)欠佳發(fā)生率高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜

12、0.01），
　　 3 VEGF在兩組子宮內(nèi)膜組織中的表達：VEGF主要表達在子宮內(nèi)膜腺上皮細胞、間質(zhì)細胞和血管內(nèi)皮細胞的胞漿中，以腺上皮細胞中表達明顯，PCOS組子宮內(nèi)膜VEGF較對照組低表達，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 4 MIF在兩組子宮內(nèi)膜組織中的表達：MIF主要表達在子宮內(nèi)膜腺上皮細胞和間質(zhì)細胞的胞漿內(nèi)，PCOS組子宮內(nèi)膜MIF較對照組低表達，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。
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