重組別藻藍(lán)蛋白對(duì)小鼠免疫調(diào)節(jié)及抗血管生成生物活性的影響.pdf

1、目的:本研究通過(guò)對(duì)接種H22肝癌細(xì)胞的小鼠給予不同劑量重組別藻藍(lán)蛋白(recombinantAllophycocyanin，rAPC)，觀察其抑瘤作用，并從免疫及抗血管生成方面初步探討其作用機(jī)制。
　　 方法:1、動(dòng)物分組及模型的建立:50只昆明小鼠購(gòu)進(jìn)后適應(yīng)性喂養(yǎng)1周，每只小鼠于右前肢腋窩皮下接種濃度為2×106/L的H22瘤細(xì)胞懸液0.2mL。24h后，隨機(jī)分為5組:模型組（A組，生理鹽水0.5mL灌胃），rAPC低、中、高

2、劑量組（BCD組，25，50，100mg/kg.d，灌胃），環(huán)磷酰胺組（CY組，E組，40mg/kg-d，腹腔注射），每組10只。ABCD組連續(xù)給藥2周，E組兩天給藥一次，持續(xù)2周。
　　 2、抑瘤率及免疫功能評(píng)價(jià):(1)末次給藥24h后，小鼠稱體質(zhì)量，處死。無(wú)菌條件下解剖小鼠，完整剝離出腫瘤，準(zhǔn)確稱質(zhì)量，計(jì)算抑瘤率。抑瘤率=（對(duì)照組平均瘤質(zhì)量-給藥組平均瘤質(zhì)量）/對(duì)照組平均瘤質(zhì)量×100％。(2)臟器指數(shù):稱胸腺及脾臟重量，計(jì)

3、算脾指數(shù)和胸腺指數(shù):脾指數(shù)=脾臟質(zhì)量/體質(zhì)量；胸腺指數(shù)=胸腺質(zhì)量/體質(zhì)量。（式中脾臟和胸腺質(zhì)量單位為mg，體質(zhì)量單位為g）；(3)相關(guān)細(xì)胞因子的測(cè)定:采用放免法(RIA)測(cè)定血清中白細(xì)胞介素－6(IL-6)、腫瘤壞死因子－α(TNF-α)的水平。
　　 3、抗血管生成功能評(píng)價(jià):免疫組織化學(xué)法檢測(cè)腫瘤組織中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)、增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)和環(huán)氧化酶－2(COX-2)的表達(dá)。
　　 結(jié)果:1、抑瘤率:

4、rAPC低劑量組小鼠H22腫瘤質(zhì)量增長(zhǎng)較模型組緩慢(P<0.05)，中、高劑量組小鼠H22腫瘤質(zhì)量增長(zhǎng)較模型組顯著緩慢(P<0.01)，抑瘤率分別為25.2％,36.7％,43.1％。
　　 2、免疫活性:rAPC各劑量組的胸腺指數(shù)上升，與模型組之間有顯著性差異（P0.05)；rAPC低、中劑量組小鼠血清

5、中IL-6和TNF-α的水平較模型組升高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），高劑量組小鼠血清中IL-6和TNF-α的水平較模型組升高，有顯著差異（P<0.01）。
　　 3、抗血管生成:rAPC各劑量組COX-2陽(yáng)性表達(dá)均低于模型組(P<0.01);rAPC各劑量組VEGF陽(yáng)性表達(dá)均低于模型組（P<0.01）；rAPC中、高劑量組PCNA陽(yáng)性表達(dá)較模型組顯著減少（P<0.01）。
　　 結(jié)論:rAPC可促進(jìn)小鼠胸腺和脾臟的生