靈芝免疫調(diào)節(jié)蛋白對(duì)肺腺癌的防治功效

1、柯俊良教授簡歷【學(xué)歷】臺(tái)大醫(yī)學(xué)院生化所博士輔仁大學(xué)生物學(xué)研究所碩士輔仁大學(xué)生物學(xué)系學(xué)士【經(jīng)歷】中山醫(yī)學(xué)大學(xué)醫(yī)學(xué)分子毒理學(xué)研究所副教授農(nóng)藥藥物毒物實(shí)驗(yàn)所藥劑系博士后研究員臺(tái)大公衛(wèi)學(xué)院HLA研究室博士研究員中山醫(yī)學(xué)院毒理學(xué)研究所助理教授【現(xiàn)任】中山醫(yī)學(xué)大學(xué)醫(yī)學(xué)分子毒理學(xué)研究所教授兼所長【專長】環(huán)境毒理﹑癌癥分子生物﹑生物農(nóng)藥近年來中草藥在抗癌方面的能力陸續(xù)被證實(shí)，其中靈芝一直被視為傳統(tǒng)中藥的翹楚，其有效成分包括靈芝多糖體，靈芝三萜類和靈芝免

2、疫調(diào)節(jié)蛋白等等。許多細(xì)胞核動(dòng)物實(shí)驗(yàn)已經(jīng)證實(shí)。靈芝多醣體和靈芝三萜類具有抗腫瘤等功能，而不同靈芝屬菌類，如小孢子靈芝（Ganodermamicrospum）﹑赤芝（Ganodermafucidium）和松杉靈芝（Ganodermatusgae），皆含有一大約13KDa分子量的蛋白質(zhì)，它們都具有促進(jìn)淋巴球增殖及刺激干擾素γ表現(xiàn)量的功能，且其胺基酸序列與免疫球蛋白重鏈區(qū)高達(dá)30﹪相識(shí)度，不具有半胱胺酸（cysteine）.因此不易被氧化和水解

3、。我的授業(yè)恩師中央研究院林榮耀院士所領(lǐng)導(dǎo)的研究團(tuán)隊(duì)。統(tǒng)稱這類蛋白質(zhì)為『靈芝免疫調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)』。靈芝免疫調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)可抑制端粒酶活性提高肺癌的治療率，降低復(fù)發(fā)的可能在許多癌癥中可偵測到端粒酶活性，而體細(xì)胞中，除了肝細(xì)胞中通常偵測不到此酶素的活性。染色體端粒酶的再活化可使正常細(xì)胞具有高度的細(xì)胞增殖速率。進(jìn)而走向不朽化，并提高正常細(xì)胞轉(zhuǎn)型成惡性腫瘤的機(jī)率。更有研究進(jìn)一步指出，非小細(xì)胞肺腺癌病人的端粒酶活性。與高度的細(xì)胞增殖速率和惡化程度有關(guān)。因而

4、推測端粒酶活性是肺癌患者重要的預(yù)后表現(xiàn)較佳。所以端粒酶的活性控制，可能是發(fā)展新型癌癥治療策略的主要標(biāo)的之一。研究進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)，靈芝免疫調(diào)節(jié)蛋白可使肺癌細(xì)胞周期停滯在G1期，走向未成熟的衰老反應(yīng)（Prematuresenescence）并明顯增加ysosome胞器增大，此為衰老細(xì)胞重要特征。一般哺乳類細(xì)胞大多會(huì)藉由兩種細(xì)胞防御機(jī)制，細(xì)胞凋亡（apoptosls）和細(xì)胞衰老（cellularsenescence）避免正常細(xì)胞走向癌化階段，這兩

5、種細(xì)胞防御機(jī)制具差異，細(xì)胞凋亡會(huì)造成細(xì)胞死亡；細(xì)胞衰老還可分為『復(fù)制衰老（replicativesenoscence）』和『未成熟衰老（prematuresenescence）』.復(fù)制衰老主要是正常細(xì)胞因?yàn)槿旧w端粒酶復(fù)制問題所產(chǎn)生的生長屏障（Hayfllcklimlt）進(jìn)而誘發(fā)的細(xì)胞反應(yīng)；未成熟的衰老則是細(xì)胞受到外在壓力（如氧化性傷害），造成年輕的細(xì)胞走向細(xì)胞老化的現(xiàn)象。這兩種細(xì)胞衰老反應(yīng)的差別主要在于，前者細(xì)胞的端粒序列長度會(huì)逐漸縮

6、短，后者細(xì)胞的端粒序列長度則不受影響，但端粒序列的穩(wěn)定受到破壞。兩者細(xì)胞型態(tài)和生理特征皆相同嗎，包括細(xì)胞外形呈現(xiàn)平坦及脹大，細(xì)胞質(zhì)顆粒狀囊泡增多，脂褐質(zhì)（lipofuscin）和B半乳糖苷酸（Bgalactosidease）的生產(chǎn)。衰老反應(yīng)所造成的生長停滯通常是細(xì)胞周期的『負(fù)調(diào)控者』，包括P53、Rb和cyclindependentkinaseinhibit(如P21CIPIP27kip1和p16INK4a).有文獻(xiàn)指出，透過活化腫瘤抑

7、制基因或抑制抑癌基因，會(huì)造成癌細(xì)胞走向未成熟的衰老反應(yīng)，產(chǎn)生類似衰老的現(xiàn)象，也有文獻(xiàn)指出，造成癌細(xì)胞走向未成熟的衰老反應(yīng)，主要是抑制端粒酶活性和誘發(fā)細(xì)胞周期負(fù)調(diào)控者的表現(xiàn)所造成，最近的研究也陸續(xù)證實(shí)，癌細(xì)胞會(huì)受到物理性或化學(xué)性傷害，而出現(xiàn)未成熟的衰老反應(yīng)。此外，以抗癌藥物Doxubicin(俗稱小紅莓)和Aphidicolin處理，也會(huì)促使腫瘤細(xì)胞趨于未成熟的衰老反應(yīng)。由此可見，誘發(fā)腫瘤細(xì)胞趨于細(xì)胞衰老階段，已被視為癌癥治療的新策略。根

8、據(jù)上述的理論基礎(chǔ)，我們利用細(xì)胞衰老的方法SABGAL染色和Acrldineange染色加以分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，經(jīng)靈芝免疫調(diào)節(jié)蛋白處理的A549肺癌細(xì)胞，細(xì)胞呈現(xiàn)SABGAL的呈色反應(yīng)則占236﹪.Acridineange的呈色反應(yīng)占450.2﹪.以同樣的方法分析Calu1肺癌細(xì)胞，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，經(jīng)靈芝免疫調(diào)節(jié)蛋白處理后，細(xì)胞呈現(xiàn)SABGal的呈色反應(yīng)占505.8﹪，Acridineange的呈色反應(yīng)則占7628﹪.不過實(shí)驗(yàn)也發(fā)現(xiàn)，經(jīng)靈芝免疫調(diào)節(jié)

9、蛋白處理的A549肺癌細(xì)胞，其端粒序列長度并未受到影響。有文獻(xiàn)指出，細(xì)胞衰老的誘發(fā)決定于端粒序列的穩(wěn)定，而不是端粒序列的縮短。未成熟的細(xì)胞衰老是抑制癌細(xì)胞生長的抗癌機(jī)制之一，因此顯示靈芝免疫調(diào)節(jié)蛋白抑制端粒酶活性，會(huì)造成肺癌細(xì)胞走向未成熟的細(xì)胞衰老。靈芝免疫調(diào)節(jié)蛋白可抑制肺癌細(xì)胞『移行』和『轉(zhuǎn)移』的能力目前國人肺腺癌治療已有部分使用標(biāo)靶治療，特別是不抽煙的女性肺腺癌患者，她們的上皮生長因子受器（epidemdkgrowthfactcrr

10、ecept簡稱EGFR）通常具有突變，所以非常適合使用標(biāo)靶治療藥，如艾瑞莎（lressa）.因?yàn)榘鹕饕舻哪繕?biāo)就是癌細(xì)胞的EGFR它會(huì)作用在EGFR位于細(xì)胞內(nèi)酪胺酸磷酸化的部分，使EGFR失去刺激癌細(xì)胞增生﹑轉(zhuǎn)移的功能。一般癌癥細(xì)胞會(huì)先有移行性，接下來才會(huì)進(jìn)行轉(zhuǎn)移作用（metastasis）.由于靈芝免疫調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)刺激A549細(xì)胞后，會(huì)使細(xì)胞的形態(tài)產(chǎn)生變化，推估可能會(huì)因此改變細(xì)胞的移行性。我們先將肺癌細(xì)胞經(jīng)不同濃度（0﹑2﹑4﹑8