金錢草粗多糖利尿排石作用機(jī)理初探.pdf

1、金錢草，為報(bào)春花科植物過路黃（Lysimachia christinae Hance）的干燥全草，是利濕退黃、利尿通淋、利濕消腫的要藥，對(duì)于預(yù)防和治療尿路結(jié)石具有良好的效果。金錢草作為市場暢銷品種，需求量呈逐年遞增的趨勢，四川作為主產(chǎn)區(qū)之一，擁有豐富的藥材資源。植物多糖具有生物活性廣泛、毒副作用小的特點(diǎn)，作為當(dāng)今生命科學(xué)和醫(yī)藥科學(xué)的研究重點(diǎn)，各國掀起了多糖研究的熱潮。金錢草中多糖含量約有8％，含量豐富，故宜加大對(duì)金錢草的基礎(chǔ)研究，為進(jìn)一

2、步開發(fā)利用金錢草提供理論依據(jù)和基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。
　　目前，對(duì)于金錢草黃酮的化學(xué)成分和藥理作用研究相對(duì)比較深入、全面，而對(duì)于金錢草多糖的研究則鮮有人問津。本文對(duì)金錢草多糖的提取工藝進(jìn)行了優(yōu)選，對(duì)多糖的醇沉工藝進(jìn)行了系統(tǒng)的研究，用Sevag法脫蛋白和大孔樹脂法對(duì)多糖進(jìn)行精制。金錢草黃酮在利尿排石、抗炎鎮(zhèn)痛方面效果顯著，而本文研究結(jié)果表明金錢草多糖在利尿方面同樣有作用，且表現(xiàn)出一定的抗炎、鎮(zhèn)痛趨勢，主要表現(xiàn)在：金錢草多糖“利尿緩慢而持久、利尿

3、不傷鈉鉀”，能一定程度地緩解小鼠炎性介質(zhì)滲出、減少疼痛扭體次數(shù)。故文章以金錢草多糖部位為研究對(duì)象，以金錢草多糖的提取工藝研究和藥理作用研究為主要研究內(nèi)容，從金錢草多糖部位制備工藝的優(yōu)選、藥理藥效的研究展開工作，研究成果如下：
　　1.金錢草多糖部位的制備
　　建立了金錢草多糖含量測定的苯酚—硫酸法（Y=0.015 X-0.058， R2=0.9998)；設(shè)計(jì)了以溶劑用量、浸提次數(shù)和時(shí)間為考察因素的正交實(shí)驗(yàn)，優(yōu)選出金錢草多糖提

4、取工藝為：加12倍量熱水，浸提3次，每次30min；以多糖得率和多糖純度為指標(biāo)設(shè)計(jì)單因素實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)研究了金錢草多糖的醇沉工藝，篩選出多糖的最佳醇沉工藝為：調(diào)節(jié)藥液濃度為0.25g生藥/mL，加入乙醇至醇含量為80%，室溫（25℃）條件下靜置12h，過濾并收集沉淀，沉淀加水溶解，重復(fù)操作3次；建立了蛋白含量測定的考馬斯亮藍(lán)法（Y=6.3685X+0.0833，r=0.9994），研究發(fā)現(xiàn)金錢草多糖蛋白脫除率僅為23.05%；以多糖純度和保有

5、率為指標(biāo)研究篩選出了金錢草多糖的DHP-20型大孔樹脂純化工藝為：DHP-20型大孔樹脂（φ20mm，長300mm，體積約30ml），粗多糖濃度為10mg/mL，料液比為1:10（mL/g），上樣速度為2mL/min，20%乙醇為洗脫劑，洗脫速度為2mL/min；最后優(yōu)選出了金錢草多糖的干燥工藝為50℃下減壓干燥。
　　2.金錢草多糖部位的藥理研究
　　將篩選合格的大鼠按體重隨機(jī)分成空白組、氫氯噻嗪組（陽性組）和多糖低、中、

6、高劑量組。分別以各時(shí)間點(diǎn)（第1h、2h、4h和6h）各組動(dòng)物的尿量變化，以及各組動(dòng)物尿液中（Na+、K+、Cl-）的排出量情況為指標(biāo)，研究其藥理作用，發(fā)現(xiàn)金錢草多糖有促進(jìn)排尿的趨勢，能一定程度地促進(jìn)原尿中Na+、K+、Cl-1的排出，其實(shí)驗(yàn)結(jié)果無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；分別以乙酰膽堿（Ach）和去甲腎上腺素（NA）為工具藥，以受試藥物對(duì)各組大鼠離體膀胱平滑肌和離體尿道平滑肌的作用為研究對(duì)象，研究其利尿機(jī)理發(fā)現(xiàn)，金錢草多糖對(duì)離體膀胱平滑肌有一定的收縮

7、作用，但無顯著性差異，能明顯抑制NA造成的尿道平滑肌收縮作用，有顯著性差異；最后，以二甲苯致小鼠耳廓腫和醋酸致小鼠扭體實(shí)驗(yàn)法進(jìn)行抗炎鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，金錢草多糖具有一定的抗炎、鎮(zhèn)痛功效，但實(shí)驗(yàn)結(jié)果無顯著性差異。
　　3.結(jié)論
　　文章對(duì)金錢草多糖的提取、純化工藝工程進(jìn)行了研究，研究數(shù)據(jù)可為實(shí)際生產(chǎn)提供一定參考。本文對(duì)比了熱水浸提及水煎煮工藝并優(yōu)選了熱水浸提工藝；首次對(duì)金錢草多糖醇沉工藝的系統(tǒng)研究優(yōu)選出了多糖的醇沉工藝；金錢草