廣金錢草及土大黃有效成分研究與應(yīng)用.pdf

1、廣金錢草為豆科山螞蝗屬植物Desmodiumstyracifolium(0sbeck)Merr.，藥用部位為干燥地上部分，主要化學(xué)成分為黃酮、皂苷、多糖、生物堿等化合物，為《中國(guó)藥典》收載的常用中藥材及成方制劑“石淋通片”的主要原料藥。具有清熱除濕，利尿通淋之功效。用于熱淋、沙淋、石淋、小便澀痛、水腫尿少、黃疸尿赤、尿路結(jié)石。到目前為止，其防治尿石癥的有效成分雖有一些研究報(bào)道，但均不十分明確。我國(guó)藥典尚未收載廣金錢草原藥材及石淋通片的含

2、量測(cè)定方法，且石淋通片采用傳統(tǒng)水提醇沉法工藝制得的浸膏片，存在服用量大，質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)難以控制等缺陷。 土大黃苷為蓼科蓼屬植物中提取分離得到的二苯乙烯類化合物，本室對(duì)其進(jìn)行的初步藥理試驗(yàn)研究表明，此化合物對(duì)糖尿病模型動(dòng)物具有降血糖作用。自從1940年首次從毛藜蘆的根中分離出白藜蘆醇以來(lái)，人們就對(duì)二苯乙烯類化合物進(jìn)行了廣泛的研究。此類化合物存在于許多植物中，是具有廣泛的生理活性的化合物。以往研究報(bào)道總的來(lái)說(shuō)主要有抗氧化、抗腫瘤、抗瘀血綜

3、合癥(腦炎、動(dòng)脈粥樣硬化、慢性炎癥)、激活巨噬細(xì)胞、抗血小板凝結(jié)、抗過(guò)敏、消除自由基等生理活性。國(guó)內(nèi)曾有廠家將其開(kāi)發(fā)成降血脂藥物，但因生產(chǎn)工藝落后，質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)水平低，產(chǎn)品純度達(dá)不到90％以上，現(xiàn)已處于停產(chǎn)狀態(tài)。 為了解決以上存在的問(wèn)題，繼而開(kāi)發(fā)出較高水平的中藥新藥，本研究在對(duì)廣金錢草及土大黃的有效成分進(jìn)行藥理篩選的基礎(chǔ)上，對(duì)有效成分的中試制備工藝進(jìn)行研究，繼而開(kāi)展了化學(xué)對(duì)照品的分離、定性定量檢測(cè)方法、藥理藥效等一系列實(shí)驗(yàn)研究。

4、 1夏佛塔苷及土大黃苷的分離與純化：天然產(chǎn)物成分復(fù)雜，含量相對(duì)較低，提取分離一定量的單體成分有相當(dāng)難度。本研究采用常規(guī)柱層析及反復(fù)重結(jié)晶，結(jié)合制備型HPLC法，分離純化得到了夏佛塔苷及土大黃苷單體，經(jīng)UV、IR、MS、NMR光譜鑒定及HPLC純度檢驗(yàn)，純度均達(dá)到98％以上，可作為含量測(cè)定用化學(xué)對(duì)照品。 2定性定量檢測(cè)方法研究：在分離得到化學(xué)對(duì)照品夏佛塔苷及土大黃苷的前提下，利用紫外分光光度法及高效液相色譜法，進(jìn)行了廣金錢草中

5、試樣品總黃酮及夏佛塔苷的含量測(cè)定、土大黃苷中試樣品的含量測(cè)定方法研究。同時(shí)進(jìn)行了廣金錢草總黃酮中大孔樹脂有機(jī)小分子殘留物的含量測(cè)定、重金屬及砷鹽的含量測(cè)定。結(jié)果表明，廣金錢草中試樣品總黃酮含量超過(guò)50％，夏佛塔苷含量超過(guò)4.5％，土大黃苷在中試樣品中含量超過(guò)90％，廣金錢草中試樣品中重金屬小于10ppm，砷鹽小于2ppm。 3中試制備工藝研究：在建立含量測(cè)定方法的基礎(chǔ)上，以總黃酮為指標(biāo)，采用正交設(shè)計(jì)法，對(duì)廣金錢草總黃酮的最佳提取

6、工藝及大孔樹脂分離純化總黃酮最佳工藝進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)研究。結(jié)果表明，以80％乙醇提取兩次，提取率達(dá)90％以上，用大孔樹脂法分離純化的總黃酮含量達(dá)50％以上；以土大黃苷為指標(biāo)，采用正交設(shè)計(jì)法，對(duì)土大黃苷的最佳提取工藝及不同大孔樹脂對(duì)土大黃苷的吸附進(jìn)行了比較研究，結(jié)果表明，用大孔樹脂法分離純化的土大黃苷，含量達(dá)90％以上。 4抗氧化作用及藥效實(shí)驗(yàn)研究：采用自旋捕集和電子順磁共振技術(shù)對(duì)廣金錢草總黃酮、土大黃苷清除活性氧自由基的作用進(jìn)行了研究