AT-158的抗癌作用機(jī)制研究（Ⅱ）.pdf

1、為了探討DHA復(fù)合物(AT-158)的抗腫瘤效應(yīng)及作用機(jī)制,該文以H22肝癌細(xì)胞、S180肉瘤細(xì)胞移植瘤的荷瘤小鼠為體內(nèi)實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?以Hela人宮頸癌細(xì)胞、HT-29人結(jié)腸癌細(xì)胞、BEL-7402人肝癌細(xì)胞為體外培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?研究了AT-158在體內(nèi)和體外對(duì)各種癌細(xì)胞的抑制作用.通過動(dòng)物模型的建立和細(xì)胞培養(yǎng),利用SDS-PAGE和Western-Blot、切片和免疫組織化學(xué)技術(shù)、吖啶橙熒光染色技術(shù)等研究了AT-158對(duì)腫瘤的抑制作用,對(duì)腫

2、瘤細(xì)胞核形態(tài)和DNA結(jié)構(gòu)的影響;AT-158對(duì)腫瘤細(xì)胞內(nèi)Caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白表達(dá)的影響等,以闡明AT-158的抗癌作用與機(jī)制.Caspase-3是Caspase家族蛋白中最為重要的凋亡執(zhí)行者之一.在凋亡執(zhí)行階段,負(fù)責(zé)對(duì)全部或者部分關(guān)鍵性蛋白的酶切(激活或者滅活).它經(jīng)由死亡受體途徑和線粒體—細(xì)胞色素C途徑激活,激活后的Caspase-3通過酶切凋亡抑制劑、直接破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)以及對(duì)DNA復(fù)制和修復(fù)的影響,造成染色質(zhì)凝集

3、、DNA降解、凋亡小體形成等細(xì)胞凋亡的改變,最終導(dǎo)致細(xì)胞凋亡的發(fā)生.Bcl-2和Bax蛋白分別是Bcl-2家族中最有代表性的抑制凋亡和促進(jìn)凋亡的蛋白,在腫瘤細(xì)胞的凋亡過程中有重要的調(diào)控作用.死亡信號(hào)能激活Bax,使Bax從細(xì)胞漿移位到線粒體膜上,并很快形成同源二聚體,促進(jìn)凋亡發(fā)生.而Bcl-2則在Bax誘發(fā)凋亡的過程中對(duì)其功能進(jìn)行限制.該實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)在腫瘤的發(fā)生和發(fā)展過程中,細(xì)胞凋亡起著重要作用.腫瘤的形成不僅是因?yàn)榧?xì)胞過度增生,也是細(xì)胞死