鉑類配合物的抗癌作用機理的研究.pdf

1、順鉑等鉑類抗癌藥物是目前在臨床上廣泛應(yīng)用的抗腫瘤藥物，超過半數(shù)以上化療方案中使用鉑類抗癌藥物，但鉑類抗癌藥物等應(yīng)用受到自身的毒副作用和腫瘤細(xì)胞固有的和獲得性的耐藥性所限制.近年來，鉑類配合物抗癌機理的研究備受關(guān)注，通過抗癌機理的研究，希望能夠指導(dǎo)合成新型的鉑類抗癌藥物，克服腫瘤的耐藥性.本論文首先基于單功能鉑類配合物的抗癌作用機理設(shè)計了一種新的鉑類配合物ampyplatin，并研究ampyplatin抗腫瘤活性以及與生物分子的相互作用;

2、同時研究順鉑與ATP7AN端的第四個金屬結(jié)合域(MNK4)的相互作用，并檢測順鉑從Atox1向MNK4的轉(zhuǎn)移，探索了ATP7A和Atox1在順鉑耐藥機理中的作用.
　　第一章是對鉑類配合物的抗癌機理的綜述.主要包括鉑類配合物類型;鉑類配合物與其靶點DNA的相互作用;腫瘤細(xì)胞對鉑類配合物耐藥性的機理.
　　第二章主要研究ampyplatin細(xì)胞毒性和ampyplatin與生物分子的相互作用.cDPCP是一種研究比較多的單功能鉑

3、類配合物,cDPCP在含硫分子作用下可以轉(zhuǎn)化為反式鉑類配合物.ampyplatin可以看作cDPCP的代謝的產(chǎn)物.在本章中首先合成表征ampyplatin，得到ampyplatin的晶體結(jié)構(gòu).然后檢測ampyplatin的細(xì)胞毒性和細(xì)胞攝取量，結(jié)果表明ampyplatin的細(xì)胞毒性與順鉑相當(dāng)，要遠遠高于cDPCP，同時能夠被細(xì)胞有效攝取.Ampyplain與DNA的相互作用表明ampyplatin和DNA的加合物主要是單功能加合物，其對

4、DNA結(jié)構(gòu)影響比順鉑要小.水解逆反應(yīng)速率較大導(dǎo)致ampyplatin水解量極少.另外通過HPLC和核磁監(jiān)測了ampyplatin和GMP反應(yīng)的動力學(xué)過程.
　　第三章主要研究ATP7A的N端第四個金屬結(jié)合域(MNK4)與順鉑的相互作用，同時檢測了順鉑從Atox1向MNK4轉(zhuǎn)移.順鉑和MNK4的銅結(jié)合區(qū)域的兩個半胱氮酸結(jié)合，Pt上的兩個氨仍能保留，順鉑的結(jié)合導(dǎo)致MNK4聚集.通過陰離子交換色譜，原子吸收，ESI-MS，以及幾丁質(zhì)樹脂

5、柱上的反應(yīng),驗證了順鉑從Atox1向MNK4的轉(zhuǎn)移.這種轉(zhuǎn)移可能和順鉑的細(xì)胞耐藥性相關(guān).說明銅轉(zhuǎn)運蛋白與順鉑的耐藥性是相關(guān)的.
　　第四章主要研究ATP7B上的N端第二個金屬結(jié)合域(WLN2)與順鉑和Atox1復(fù)合物(Pt/Atox1)的相互作用.WLN2與順鉑的反應(yīng)在不同的還原劑下會有不同的結(jié)果.其中DTT作為還原劑時Pt上的氨都保留:而使用TCEP作為還原劑則Pt上的氨不再保留.WLN2與Pt/Atox1反應(yīng)后.WLN2銅結(jié)合

6、區(qū)域的氨基酸殘基的化學(xué)位移發(fā)生變化,表明Pt從Atox1向WLN2轉(zhuǎn)移.
　　第五章研究Pt/Atox1與DNA的相互作用.通過DNA凝膠電泳和ICP-MS發(fā)現(xiàn)Pt可以從Atox1向超螺旋質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)移.這說明Atox1可以將鉑轉(zhuǎn)移向不同的目標(biāo).
　　第六章研究銅轉(zhuǎn)運蛋白Ctr1的C端八肽(C8)與Cu(Ⅰ)的相互作用，以及Cu(Ⅰ)從C8向Atox1轉(zhuǎn)移.結(jié)果表明C8可以與多個Cu(Ⅰ)結(jié)合，其中和一個Cu(Ⅰ)解離常數(shù)為