A型肉毒毒素對大鼠化學性內(nèi)臟損傷的止痛作用.pdf

1、[背景與目的]：A型肉毒毒素(BTX-A)目前已廣泛應用于肌肉活動過度性疾病的治療，近年來，BTX-A在疼痛治療中有了突破性進展，除了用于緩解由于肌肉痙攣的各種疼痛，目前已成功用于治療頭痛肌筋膜痛綜合癥，頑固性三叉神經(jīng)痛，間質(zhì)性膀胱炎，足底筋膜炎，慢性腰背痛，慢性前列腺痛等。而BTX-A阻斷神經(jīng)肌肉接頭乙酰膽堿的釋放，松弛肌肉的作用不能完全解釋其止痛效應，因此認為BTX-A的抗傷害性感受作用尚存在更為復雜的機制。一些軀體痛和內(nèi)臟痛的動物

2、模型研究表明，BTX-A能抑制外周感覺神經(jīng)末梢谷氨酸和神經(jīng)肽類(如P物質(zhì)，降鈣素基因相關肽)等神經(jīng)遞質(zhì)的釋放，減少脊髓背角神經(jīng)元c-fos的表達，減少傷害性刺激向中樞神經(jīng)系統(tǒng)傳導。本研究通過復制大鼠化學性內(nèi)臟損傷的疼痛模型，觀察BTX-A對疼痛行為學的影響和對外周神經(jīng)遞質(zhì)，細胞因子等表達的影響，對其可能的止痛效應和作用機制進行初步探索，為BTX-A的深入研究及更廣泛的臨床應用提供新視角。 [方法]：出生8周Wistar雄性大鼠9

3、6只，隨機分為4組，A組腹腔注射生理鹽水2mL。B、C、D組腹腔分別注射含2U、4U、6U BTX-A的生理鹽水2mL。4周時各組隨機取6只應用結(jié)直腸內(nèi)氣囊擴張的方法測定結(jié)直腸痛閩的改變。其余大鼠分別于注射BTX-A后1周、4周、8周各組隨機取6只，腹腔內(nèi)注射乙酸(2％，3 ml/kg)，觀察大鼠扭體反應45min，并進行行為學評分和比較。應用放射免疫法測定血清IL-6和TNF的含量，取大鼠小腸、大腸標本，行蘇木素伊紅染色及腸壁AChE

4、、SP、CGRP免疫組織化學半定量分析，評價BTX-A對細胞因子和外周神經(jīng)遞質(zhì)的影響。免疫組化結(jié)果用彩色病理圖像分析系統(tǒng)image-pro plus 5.0進行半定量分析。計量資料采用sPss11.5統(tǒng)計軟件處理，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。 [結(jié)果]給藥后4周B組、C組、D組大鼠結(jié)直腸痛閾與A組結(jié)果無明顯差異。1周時，大鼠扭體反應45分鐘內(nèi)，總的疼痛積分B組與對照組無統(tǒng)計學差異，C組，D組均少于對照組(P<0.05)；D組

5、血清TNF較A組明顯減少(P<0.05)，B，C組血清TNF及B、C、D組IL6與A組相比無明顯差異，；BTX-A預處理組腸壁肌層AChE表達均小于A組(P<0.05)，B組腸壁粘膜層SP表達較A組明顯減少(P<0.05)，腸壁肌層SP陽性面積及腸壁CGRP表達與A組比較無顯著差異，C、D組腸壁SP及CGRP表達均較A組明顯減少(P<0.05)。4周時，B，C，D組大鼠在各個時間段疼痛積分及總的疼痛積分與對照組相比均明顯減少(P<0.0

6、5)；C，D組血清TNF及D組IL-6較A組明顯減少(P<0.05)；B，C，D組腸壁AChE、SP、CGRP表達均明顯小于A組(P<0.05)。8周時，B，C，D組大鼠各個時間段疼痛積分與對照組無明顯差別，總的疼痛積分C組與A組相比減少有統(tǒng)計學意義，B，D組與A組相比仍無差異；各BTX-A預處理組血清IL-6，TNF及腸壁SP、CGRP表達與A組相比均無差異，但腸壁AChE表達仍小于A組(P<0.05)。 [結(jié)論]腹腔注射A型