A型肉毒桿菌毒素對(duì)大鼠骨骼肌細(xì)胞凋亡影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、研究目的: 近年來(lái)BTXA注射后肌肉細(xì)胞微結(jié)構(gòu)、功能的變化倍受關(guān)注。大量研究發(fā)現(xiàn)BTXA可誘導(dǎo)對(duì)多種組織細(xì)胞發(fā)生凋亡，并發(fā)現(xiàn)可通過(guò)影響骨骼肌肌蛋白轉(zhuǎn)錄因子(MyoD)的表達(dá)，從而使骨骼肌細(xì)胞發(fā)生細(xì)胞凋亡。但由于BTXA有化學(xué)去神經(jīng)的作用，組織細(xì)胞失去神經(jīng)支配后本身就可以造成肌肉萎縮，因此很難排除其化學(xué)失神經(jīng)因素誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡機(jī)制干擾，無(wú)法觀察BTXA直接對(duì)骨骼肌細(xì)胞凋亡影響。針對(duì)于此本實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)特殊機(jī)械去神經(jīng)+BTXA注射動(dòng)物模型

2、，通過(guò)與單純機(jī)械去神經(jīng)組比較，利用流式細(xì)胞儀PI法，和Annexin、PI雙染法，探討B(tài)TXA對(duì)肌細(xì)胞凋亡影響程度及bcl-2、和bax表達(dá)情況。為臨床更安全、有效地的使用BTXA提供理論依據(jù)。 研究方法: 36只成年雌性SD大鼠隨機(jī)分為4組(A，B，C，D)，生理鹽水對(duì)照組(A組)、單純離斷腓神經(jīng)組(B組)、離斷腓神經(jīng)+BTXA注射組(C組)、單純BTXA注射組(D組)。于術(shù)后2周后、4周、8周每組各處死動(dòng)物3只，收集

3、雙側(cè)腓腸肌肌肉標(biāo)本，采用流式細(xì)胞儀PI標(biāo)記法和Annexin V、PI雙染法對(duì)大鼠腓腸肌成肌細(xì)胞的凋亡百分率進(jìn)行檢測(cè)；采用免疫組化法檢測(cè)bcl-2、bax蛋白表達(dá)，并進(jìn)行組間比較。 結(jié)論: 1．BTXA具有誘導(dǎo)骨骼肌細(xì)胞凋亡的作用，并使Bax蛋白表達(dá)增加，對(duì)Bcl-2表達(dá)無(wú)明顯影響，提示BTXA可能通過(guò)誘導(dǎo)骨骼肌細(xì)胞凋亡機(jī)制導(dǎo)致大鼠骨骼肌發(fā)生萎縮。 2．單純注射BTXA與機(jī)械去神經(jīng)相比，同樣具有導(dǎo)致骨骼肌凋亡及肌