補(bǔ)腎調(diào)氣法治療腦出血后抑郁的機(jī)理研究.pdf

1、目的：根據(jù)卒中后抑郁(PSD)的內(nèi)源性機(jī)制學(xué)說(shuō)和反應(yīng)性機(jī)制學(xué)說(shuō)，建立腦出血后抑郁動(dòng)物模型，觀察腦出血后抑郁大鼠動(dòng)物腦內(nèi)單胺遞質(zhì)及單胺神經(jīng)受體表達(dá)的變化，探討腦出血后抑郁的發(fā)病機(jī)理。提出腦出血后抑郁的病機(jī)為。腎虛氣郁、痰瘀互結(jié)、腦髓失養(yǎng)，探討以補(bǔ)腎調(diào)氣為治法的方藥頤腦解郁對(duì)腦出血后抑郁的治療機(jī)理。 方法：1．選擇雄性Wistar大鼠經(jīng)Open—Field行為學(xué)評(píng)分隨機(jī)分為正常組、出血組、抑郁組、模型組。正常組予正常食水。出血組，膠

2、原酶誘導(dǎo)腦出血。抑郁組與模型組一同接受21天的不可預(yù)知性的慢性應(yīng)激刺激合并孤養(yǎng)。模型組，膠原酶誘導(dǎo)腦出血，術(shù)后7天開(kāi)始21天的慢性應(yīng)激刺激合并孤養(yǎng)。應(yīng)激結(jié)束后進(jìn)行行為學(xué)測(cè)定(糖水消耗量、Open—Field測(cè)定)，后用免疫組化法測(cè)定單胺神經(jīng)遞質(zhì)受體的表達(dá)，對(duì)腦邊緣系統(tǒng)進(jìn)行圖像分析，觀察所測(cè)定指標(biāo)陽(yáng)性表達(dá)的光密度值和面積值。 2．選擇雄性Wistar大鼠經(jīng)Open—Field行為學(xué)評(píng)分隨機(jī)分為正常組、模型組、西藥組和中藥組。正常組

3、常規(guī)飼養(yǎng)，模型組、中藥組和西藥組予膠原酶誘導(dǎo)腦出血手術(shù)，術(shù)后7天開(kāi)始予21天的慢性不可預(yù)知的溫和應(yīng)激，應(yīng)激結(jié)束中藥組予頤腦解郁方灌胃每日1次，共6周；西藥組灌胃氟西汀，每日1次，共6周。灌胃結(jié)束后進(jìn)行行為學(xué)測(cè)定，后用免疫組化法測(cè)定腦內(nèi)單胺神經(jīng)遞質(zhì)受體表達(dá)及應(yīng)用高壓液相電化學(xué)法測(cè)定腦內(nèi)單胺神經(jīng)遞質(zhì)含量，對(duì)腦邊緣系統(tǒng)進(jìn)行圖像分析，觀察所測(cè)定指標(biāo)陽(yáng)性表達(dá)的光密度值和面積值。 結(jié)果：1．腦出血大鼠在各周與正常組大鼠無(wú)明顯差異；抑郁組在第

4、15天后蔗糖水的消耗量下降，與正常組比有明顯差異(P<0.05)，在第21天后，蔗糖水的消耗量下降，與正常組相比有顯著差異(P<0.01)；模型組大鼠蔗糖水的消耗量在第15天和第21天后蔗糖水的消耗量下降，與正常組相比有顯著差異(P<0.01)。敞箱試驗(yàn)結(jié)果，模型組、抑郁組、出血組水平活動(dòng)和垂直活動(dòng)次數(shù)較正常組相比，均有顯著性差異(P<0.01)。 5-TH<,1Λ>R測(cè)定：出血組大鼠扣帶皮質(zhì)、杏仁皮質(zhì)和下丘腦陽(yáng)性細(xì)胞光密度較正

5、常組增高(P<0.05)；抑郁組大鼠陽(yáng)性細(xì)胞在扣帶皮質(zhì)減少，面密度降低(P<0.05)，杏仁皮質(zhì)、下丘腦表達(dá)顏色變深，光密度較正常組增高(P<0.05)；模型組大鼠在扣帶皮質(zhì)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)減少，面密度降低(P<0.05)，杏仁皮質(zhì)、下丘腦表達(dá)顏色變深，光密度較正常增高(P<0.05，P<0.01)。D<,2>DR測(cè)定：與正常組比較，腦出血組大鼠海馬CA1區(qū)D<,2>DR陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)減弱，光密度和面密度均較降低(P<0.05)；抑郁組大鼠梨狀

6、皮層陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)增多，面密度增高(P<0.01)，但陽(yáng)性細(xì)胞顏色變淺，光密度降低(P<0.01)，海馬CA3陽(yáng)性細(xì)胞染色變淺，光密度降低(P<0.05)；模型組大鼠海馬CA1、CA3、扣帶皮質(zhì)內(nèi)陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)明顯減弱，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量也明顯減少，細(xì)胞排列稀疏，扣帶皮質(zhì)光密度和杏仁皮質(zhì)光密度、面密度較降低(P<0.05)，海馬CA1光密度和CA3面密度降低(P<0.05)。 2．中藥組和西藥組蔗糖水消耗量較模型組增加(P<0.05)。中

7、藥組和西藥組大鼠水平走格數(shù)與模型組比較有顯著增加(P<0.05)。 大腦前皮質(zhì)單胺遞質(zhì)含量：模型組5-HT含量低于正常組(P<0.01)，西藥組、中藥組5-HT含量較模型組顯著增加(P<0.05)；模型組前皮質(zhì)NE含量低于正常組(P<0.05)，中藥、西藥組較模型組NE顯著增加(P<0.05)；模型組前皮質(zhì)5-HIAA含量低于正常組(P<0.05)，西藥組、中藥組較模型組5-HIAA含量有增高趨勢(shì)，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。左側(cè)海馬單胺遞

8、質(zhì)含量：模型組5-HT、NE和DA含量低于正常組(P<0.01；P<0.05)；中藥組5-HT、DA、NE含量高于模型組(P<0.05)；西藥組5-HT含量高于模型組(P<0.05)3.5-TH<,1Λ>R測(cè)定：模型組大鼠杏仁皮質(zhì)、下丘腦5-HT<,1Λ>R陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)較正常光密度有增加(P<0.05)，中藥組扣帶皮質(zhì)和CA3區(qū)陽(yáng)性細(xì)胞面密度較模型組降低；西藥組杏仁皮質(zhì)、下丘腦和CA3區(qū)光密度和CA3面密度較模型組降低(P<0.05)。

9、D<,2>DR測(cè)定：與正常組比較，模型組大鼠扣帶皮質(zhì)、海馬CA1區(qū)D<,2>DR陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)顏色變深，光密度升高(P<0.05)：杏仁核、海馬CA1、CA3區(qū)D<,2>DR陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)面積減少(P<0.05);梨狀皮質(zhì)、CA3區(qū)D<,2>DR陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)顏色變淺，光密度降低(P<0.05)。與模型組比較，西藥組扣帶皮質(zhì)和海馬CA1陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)變淺(P<0.05)：杏仁核、海馬CA3區(qū)染色加深，光密度增加(P<0.05)，但同時(shí)表達(dá)面積下

10、降(P<0.05)。與模型組比較，中藥組扣帶皮質(zhì)和海馬CA1陽(yáng)性細(xì)胞光密度降低(P<0.05)，梨狀皮質(zhì)、杏仁核和海馬CA3染色加深，光密度增高(P<0.05)：但在海馬CA1區(qū)表達(dá)面積減少(P<0.05)。 結(jié)論：采用膠原酶誘導(dǎo)腦出血模型復(fù)合慢性不可預(yù)知溫和應(yīng)激和孤養(yǎng)法可建立腦出血后抑郁大鼠模型該模型，模型動(dòng)物在行為學(xué)上表現(xiàn)出興趣和快感缺乏活動(dòng)性減少模擬了卒中后抑郁的主要癥狀，與臨床腦出血后抑郁疾病癥狀存在一致性；同時(shí)該模型模