Fibulin-3、TIMP-3和Elastin在壓力性尿失禁患者陰道壁組織中的表達(dá)研究.pdf

1、壓力性尿失禁(stress urinary incontinence，SUI)是指既不是逼尿肌收縮壓，又不是由于膀胱壁對(duì)尿液的張力壓作用引起的，咳嗽、大笑等腹壓增加的情況下，尿液不自主流出的病理現(xiàn)象。SUI常與生殖器官的膨出和脫垂相伴發(fā)生，給患者的日常生活帶來(lái)很大的影響，使患者的生活質(zhì)量明顯下降，并造成了嚴(yán)重的社會(huì)經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。女性壓力性尿失禁的發(fā)病原因很復(fù)雜，有多種因素參與，國(guó)內(nèi)外學(xué)者從解剖學(xué)、形態(tài)學(xué)、功能學(xué)等方面對(duì)SUI的發(fā)病機(jī)制進(jìn)行了

2、大量研究，但其確切機(jī)制仍未闡明。多種研究表明盆底支持組織中結(jié)締組織的結(jié)構(gòu)功能改變可能對(duì)SUI的發(fā)生具有重要的作用。
　　 Fibulin-3(即EFEMP1)是人體組織發(fā)育過(guò)程中廣泛表達(dá)的一種細(xì)胞外糖蛋白，屬于Fibulin蛋白家族。Fibulin-3能與ECM1、TIMP-3、CollagenⅩⅧ和原彈性蛋白等相互作用，對(duì)于保持基膜的完整性以及穩(wěn)定細(xì)胞外基質(zhì)( extracellarmatrix，ECM)結(jié)構(gòu)發(fā)揮著重要作用。組

3、織金屬蛋白酶抑制劑(tissue inhibitors ofmetalloproteinases，TIMPs)是一個(gè)多基因編碼的分泌型蛋白家族，是基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinases，MMPs)的天然特異性抑制物，通過(guò)與MMPs特異性結(jié)合，維持細(xì)胞外基質(zhì)的穩(wěn)定狀態(tài)。盆底結(jié)締組織主要由韌帶和筋膜組成，它的機(jī)械特性和支持性由構(gòu)成組織的分子如膠原(collagen)、彈性蛋白(elastin)、蛋白聚糖和糖蛋白的

4、結(jié)構(gòu)、組成比例以及彼此之間的相互作用決定。其中膠原和彈性蛋白作為結(jié)締組織的主要成分，在維持盆底支持組織的功能上起重要作用。既往對(duì)盆底功能障礙結(jié)締組織的研究主要集中在膠原的變化；有研究表明盆底功能障礙患者陰道壁中與彈性蛋白代謝有關(guān)的基因發(fā)生變化，提示彈性蛋白重塑可能在SUI發(fā)生中具有一定的作用。
　　 目的：
　　 本研究采用免疫組化(S-P)法檢測(cè)Fibulin-3、TIMP-3和elastin在女性SUI患者陰道壁結(jié)締

5、組織中的表達(dá)水平，并進(jìn)行各個(gè)指標(biāo)間的相關(guān)性分析，從而進(jìn)一步探討、分析盆底支持組織結(jié)構(gòu)和代謝的變化在SUI發(fā)生、發(fā)展中的作用。
　　 材料與方法：
　　 1材料
　　 選擇2009年8月～2010年2月在鄭州大學(xué)第三附屬醫(yī)院婦科住院手術(shù)治療的患者，其中壓力性尿失禁患者（SUI組）30例，盆底器官脫垂患者(POP組)30例，良性婦科疾病患者（對(duì)照組）30例。三組患者均符合診斷，無(wú)既往盆底手術(shù)史。SUI組行經(jīng)閉孔無(wú)張力

6、尿道中段懸吊術(shù)(trans-obturator vaginal tape，TVT-O)、TVT-S術(shù)或陰道前壁修補(bǔ)術(shù)；POP組行前盆底懸吊術(shù)或陰道前壁修補(bǔ)術(shù)；對(duì)照組行陰式或腹式子宮切除術(shù)。術(shù)中切取患者陰道前壁上段12點(diǎn)處全層組織約0.5cm×0.5cm×0.5cm大小。
　　 2方法
　　 采用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)SUI組、POP組和對(duì)照組患者陰道壁組織中Fibulin-3、TIMP-3和elastin的表達(dá)情況。

7、　　 3結(jié)果判定
　　 應(yīng)用電子計(jì)算機(jī)圖像分析系統(tǒng)分析三組患者陰道壁組織中Fibulin-3、TIMP-3和elastin免疫組織化學(xué)陽(yáng)性染色區(qū)平均灰度值。在圖像分析中，免疫組織化學(xué)染色的強(qiáng)弱與灰度值呈正比關(guān)系，陽(yáng)性物質(zhì)越高，染色越深，灰度值越大，反之越小。
　　 4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
　　 所得數(shù)據(jù)經(jīng)Excel2003錄入，建立數(shù)據(jù)庫(kù)，各組數(shù)據(jù)的平均灰度值均以(-x)±s表示，應(yīng)用SPSS16.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

8、計(jì)量資料各組間的均數(shù)比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用LSD檢驗(yàn)。采用Pearson相關(guān)分析來(lái)分析各指標(biāo)間的相關(guān)性。以上檢驗(yàn)方法均以α=0.05作為檢驗(yàn)水準(zhǔn)。
　　 結(jié)果：
　　 1．免疫組化染色結(jié)果
　　 三組患者陰道壁組織中均可見(jiàn)Fibulin-3蛋白、TIMP-3蛋白和elastin蛋白的表達(dá)，呈淡黃色至棕黃褐色。Fibulin-3蛋白和elastin蛋白主要表達(dá)于細(xì)胞外基質(zhì)，呈淡黃色至棕黃褐色彌漫性

9、分布；TIMP-3蛋白主要表達(dá)于胞漿，細(xì)胞漿中呈現(xiàn)淡黃色至棕黃褐色顆粒的細(xì)胞為陽(yáng)性細(xì)胞。
　　 2．Fibulin-3蛋白的表達(dá)
　　 ①Fibulin-3蛋白在SUI組中的表達(dá)明顯低于對(duì)照組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)，②Fibulin-3蛋白在POP組中的表達(dá)明顯低于對(duì)照組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)，③Fibulin-3蛋白在SUI組和POP組間的表達(dá)無(wú)明顯差異(P＞0.05)。
　　 3．TIMP-3

10、蛋白的表達(dá)
　　 ①TIMP-3蛋白在SUI組中的表達(dá)明顯低于對(duì)照組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)，②TIMP-3蛋白在POP組中的表達(dá)明顯低于對(duì)照組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)，③TIMP-3蛋白在SUI組和POP組間的表達(dá)無(wú)明顯差異（P＞0.05）。
　　 4．Elastin蛋白的表達(dá)
　　 ①Elastin蛋白在SUI組中的表達(dá)明顯低于對(duì)照組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)，②Elastin蛋白在POP組中