放射線誘導(dǎo)性自殺基因的構(gòu)建及其體內(nèi)外治療肝癌的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:1、構(gòu)建可被放射線激活而轉(zhuǎn)錄的早期生長(zhǎng)反應(yīng)基因-1(Egr-1)啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)的單純皰疹病毒胸苷激酶基因(herpes simplex virus thymidine kinasegene HSV-tk簡(jiǎn)稱為tk)pET(pCL-neo-Egr-1-tk).2、利用脂質(zhì)體將重組真核表達(dá)載體pET質(zhì)粒轉(zhuǎn)染人肝癌細(xì)胞株;SMMC-7721,研究其在<'60>Co-γ射線照射后在肝癌細(xì)胞中的表達(dá)以及在前藥丙氧鳥苷(ganciclovir G

2、CV)作用下體外對(duì)肝癌細(xì)胞的殺傷作用,3、將轉(zhuǎn)染了pET的人SMMC-7721肝癌細(xì)胞種植于balb/c裸小鼠皮下,建立裸鼠肝癌移植瘤模型,研究放射線誘導(dǎo)性自殺基因(pET)在射線作用下體內(nèi)對(duì)肝癌的治療作用.結(jié)論:1、構(gòu)建的放射線誘導(dǎo)性真核表達(dá)載體pET在<'60>Co-γ射線外照射作用下,可激活Egr-1啟動(dòng)子,引起tk基因在肝癌細(xì)胞中高效表達(dá)并呈劑量依賴性.2、可被放射線激活而轉(zhuǎn)錄的放射線誘導(dǎo)性啟動(dòng)子Egr-1可驅(qū)動(dòng)tk基因在肝癌細(xì)