版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權,請進行舉報或認領
文檔簡介
1、目的:
建立無標記探針分子診斷技術檢測基因SNP。
方法:
采用新型熒光染料建立無標記探針分子診斷技術進行基因的SNP分型。設計IL-1B基因-511T>C、-31T>C、3954C>T和IL-6基因-174G>C、-597G>A以及IL-6R基因外顯子358A>C等SNP位點的擴增引物和無標記探針。以其中IL-6基因-597G>A位點為例,按PCR擴增效率和產(chǎn)物特異性進行不同染料Mg2+濃度、
2、DNA聚合酶、不對稱PCR引物比例、模板濃度以及退火溫度等擴增條件的優(yōu)化。并以此優(yōu)化體系為基礎建立各位點聚合酶鏈反應-無標記探針(PCR-UP)技術分子診斷方法,同時用所建立的擴增體系對100例臨床標本進行IL-6基因-597G>A和-174G>C位點的基因分型,分型后的雜合型和突變型PCR產(chǎn)物以測序金標準進行驗證。
結(jié)果:
結(jié)果顯示EvaGreen熒光PCR檢測體系最適Mg2+濃度為2.5 mmol/L,金
3、思特realstartTaq DNA polymerase擴增效率和PCR產(chǎn)物特異性最佳,模板最低濃度可達10ng/10μL;IL-1B基因-511T>C、-31T>C、3954C>T的引物不對稱比例為0.02/0.3umol/L,IL-6基因-174G>C和-597G>A位點的引物比例為0.1/0.5 umol/L,IL-6R基因外顯子358A>C位點不對稱PCR引物比例為0.05/0.5/μmol/L時PCR擴增效率和產(chǎn)物特異性最好
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責。
- 6. 下載文件中如有侵權或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 單核苷酸多態(tài)性核酸試紙條檢測技術的建立.pdf
- 水稻的單核苷酸多態(tài)性研究.pdf
- 基于表達序列標簽的玉米單核苷酸多態(tài)性標記開發(fā).pdf
- 櫛孔扇貝(Chlamys farreri)單核苷酸多態(tài)性(SNP)標記的開發(fā)及應用.pdf
- 柑橘單核苷酸多態(tài)性分子標記的篩選及其在遺傳多樣性研究中的應用.pdf
- 甘藍型油菜黃籽核心種質(zhì)的建立和相關單核苷酸多態(tài)性標記的篩選.pdf
- 腫瘤細胞中MTHFR和DPYD基因單核苷酸多態(tài)性的檢測.pdf
- 野生、半野生和栽培大豆的單核苷酸多態(tài)性.pdf
- 食管癌預后和單核苷酸多態(tài)性的關系.pdf
- 研究應用DHPLC技術篩查ANPEP基因單核苷酸多態(tài)性.pdf
- 55299.基于tdifp技術的高通量單核苷酸多態(tài)性分析系統(tǒng)的建立和初步應用
- 大豆作圖群體親本的單核苷酸多態(tài)性.pdf
- 肉牛PPARG基因單核苷酸多態(tài)性的研究.pdf
- 25890.單核苷酸多態(tài)性分析算法的研究與應用
- ISS患兒GHR基因單核苷酸多態(tài)性的研究.pdf
- 梅毒免疫相關基因的單核苷酸多態(tài)性研究.pdf
- 壓電生物傳感器檢測單核苷酸多態(tài)性的實驗研究和臨床應用.pdf
- 線粒體DNA編碼區(qū)單核苷酸多態(tài)性研究.pdf
- 大豆脂肪酸代謝相關基因單核苷酸多態(tài)性.pdf
- 線粒體DNA單核苷酸多態(tài)性(SNPs)微測序檢測方法的研究.pdf
評論
0/150
提交評論