重組腺相關(guān)病毒攜帶CEA感染DC誘導(dǎo)CTL抗lovo直腸癌細(xì)胞活性的研究.pdf

1、目的：
　　 通過(guò)用流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)重組腺相關(guān)病毒感染lovo直腸癌患者的DC誘導(dǎo)CTL對(duì)lovo細(xì)胞的殺傷率和DC的CEA和CD分子的表達(dá)，證明此種感染誘導(dǎo)方法可以增強(qiáng)誘導(dǎo)的CTL的能力，并且可以提高患者DC細(xì)胞的成熟。
　　 方法：
　　 利用密度梯度離心法從患者體內(nèi)獲取單個(gè)核細(xì)胞再聯(lián)合應(yīng)用rhGM-CSF、rhIL-4和thTNF-α細(xì)胞因子誘導(dǎo)DC成熟，分成實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組，實(shí)驗(yàn)組加入攜帶CEA重組腺相關(guān)病

2、毒感染DC誘導(dǎo)CTL，對(duì)照組加入等量的PBS。用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)DC的表型及CTL對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷活性。采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件包對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
　　 結(jié)果：
　　 1、形態(tài)學(xué)觀(guān)察：DC從培養(yǎng)第2天起細(xì)胞形態(tài)出現(xiàn)不規(guī)則改變，周邊可見(jiàn)少量突起，第4天加入thTNF-α后，細(xì)胞體積增大，細(xì)胞表面有大量長(zhǎng)短不一的突觸，與正常DC相比，未見(jiàn)明顯差別，提示rAAV病毒感染并不影響DCs的生長(zhǎng)。
　　 2、實(shí)驗(yàn)組

3、DC的CD40、CD80、CD86表達(dá)率分別為(81.95±1.45)％、(80.10±1.03)％和(58.93±1.84)％，而對(duì)照組DC的CD40、CD80、CD86表達(dá)率分別為(72.27±1.59)％、(70.59±1.04)％和(48.66±1.97)％，兩組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.05。
　　 3、實(shí)驗(yàn)組CEA的表達(dá)率為(59.04±1.68)％，對(duì)照組的CEA表達(dá)率為(46.03±1.23)％，兩組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)

4、意義，P＜0.05。
　　 4、在效靶比為12.5∶1、25∶1、50∶1、100∶1時(shí)實(shí)驗(yàn)組的殺傷率分別為(12.65±0.30)％、(20.77±2.53)％、(43.36±0.83)％和(61.03±1.83)％；而對(duì)照組的殺傷率分別為(6.59±0.21)％、(8.35±1.12)％、(12.79±0.23)％和(23.35±0.69)％，兩組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.05。并且隨著效應(yīng)細(xì)胞比例的增加，殺傷率也逐漸增加。