酪氨酸激酶抑制劑IRESSA（易瑞莎）在肝細(xì)胞性肝癌靶向治療中作用的研究.pdf

1、原發(fā)性肝細(xì)胞性肝癌(hepatocellularcarcinoma，HCC)的生物學(xué)特性非常復(fù)雜，腫瘤發(fā)展快，術(shù)后復(fù)發(fā)率高，預(yù)后較差。近年來，一些新的方法及新模式相繼引入肝癌臨床治療，確立了以外科手術(shù)為主的肝癌綜合治療概念。提高肝癌治療療效的關(guān)鍵在于預(yù)防和治療術(shù)后復(fù)發(fā)，以及選擇合理的綜合治療方案。由于分子生物學(xué)的迅猛發(fā)展，使得腫瘤的生物治療成為繼手術(shù)、放療、化療之后的第四種治療模式，而分子靶向藥物在多種實(shí)體瘤的臨床應(yīng)用，更充滿了生機(jī)和活

2、力。 易瑞莎(IRESSA,gefitinib,ZD1839)是近年發(fā)現(xiàn)的一種小分子表皮生長因子受體酪氨酸激酶抑制劑。IRESSA對許多腫瘤細(xì)胞株和動(dòng)物腫瘤生長均有抑制作用。IRESSA可以抑制細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)細(xì)胞周期阻滯和細(xì)胞凋亡，并具有抗血管生成活性和抗轉(zhuǎn)移特性；還能逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞的耐藥性，增強(qiáng)細(xì)胞毒性藥物的生長抑制效應(yīng)；與放療聯(lián)用時(shí)，亦具有添加劑或者協(xié)同效應(yīng)。 目前研究結(jié)果顯示IRESSA可以抑制許多類型癌細(xì)胞的生長，

3、但其在肝癌中的治療作用，目前未見系統(tǒng)報(bào)道。本研究應(yīng)用免疫組化染色技術(shù)，檢測HCC中酪氨酸激酶受體的蛋白表達(dá)特點(diǎn)，分析其與臨床病理之間的關(guān)系。并選擇與肝癌發(fā)生、發(fā)展關(guān)系密切的表皮生長因子受體(epidermalgrowthfactorreceptor，EGFR)作為分子靶，選用相應(yīng)藥物IRESSA作用于人肝癌細(xì)胞，通過MTT試驗(yàn)，流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡、克隆形成等方法，探討應(yīng)用分子靶向藥物IRESSA治療肝癌的可行性。 研究目的

4、 1.研究酪氨酸激酶受體在HCC中的表達(dá)特點(diǎn)，分析其與臨床病理之間的關(guān)系，探討酪氨酸激酶受體在腫瘤發(fā)生、發(fā)展中的作用，選擇可能的分子靶。 2.選用EGFR酪氨酸激酶抑制劑IRESSA處理人肝癌細(xì)胞株，研究IRESSA對肝癌細(xì)胞的作用。 3.IRESSA與常用的放化療方法聯(lián)合作用于人肝癌細(xì)胞株，探討IRESSA對放化療有無增敏作用。 研究方法 1.酪氨酸激酶受體在HCC中的表達(dá)特點(diǎn)及其與臨床病理間的關(guān)

5、系 收集臨床HCC患者的組織標(biāo)本及完整的臨床病歷資料，免疫組化SP法檢測103例人肝癌組織中CD117、EGFR、C-erbB-2的表達(dá)，并根據(jù)臨床資料分析與臨床病理間的關(guān)系。 2.應(yīng)用小分子酪氨酸激酶受體抑制劑IRESSA作用于人肝癌細(xì)胞株，通過MTT法檢測細(xì)胞抑制率，流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡的變化。 3.IRESSA與放化療聯(lián)合作用于肝癌細(xì)胞，通過MTT法及克隆形成分析判斷有無協(xié)同作用。 研究結(jié)果

6、 1.肝癌組織中EGFR蛋白表達(dá)陽性率高，總體陽性率為95.15％，且隨著臨床分期及組織學(xué)分級增高而呈增強(qiáng)趨勢。 2.表皮生長因子受體酪氨酸激酶抑制劑IRESSA對人肝癌細(xì)胞的生長有抑制作用，能夠誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生凋亡，并且其藥效有劑量和時(shí)間依賴效應(yīng)。 3.IRESSA與傳統(tǒng)化療藥物或放療聯(lián)合作用于肝癌細(xì)胞，在一定劑量范圍內(nèi)呈現(xiàn)協(xié)同作用，細(xì)胞抑制率明顯增加，與單純化療及單純放療相比有顯著性差異(p＜0.05)。 結(jié)論

7、 1.肝癌組織中EGFR蛋白表達(dá)陽性率高，EGFR可能參與肝細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化及肝癌的進(jìn)展，可能成為預(yù)測HCC術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的一項(xiàng)參考指標(biāo)和HCC治療的分子靶。 2.體外實(shí)驗(yàn)證明，EGFR在人肝癌細(xì)胞中呈過度表達(dá)，酪氨酸激酶抑制劑IRESSA可誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡、抑制肝癌細(xì)胞的生長。 3.酪氨酸激酶抑制劑IRESSA能夠增加肝癌細(xì)胞對放化療的敏感性，提示IRESSA與放化療聯(lián)合應(yīng)用可提高HCC放化療療效，具有一定的臨床應(yīng)用前