mda-7-IL-24抑制肝癌生長(zhǎng)侵襲和轉(zhuǎn)移的研究.pdf

1、目的:
　　將重組腺病毒介導(dǎo)的mda-7/IL-24基因(melanoma differentiation-associated gene-7)轉(zhuǎn)染高轉(zhuǎn)移性人肝癌細(xì)胞HCCLM6,探索該基因治療對(duì)肝癌細(xì)胞侵襲力的作用.并通過(guò)檢測(cè)與侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)的生化指標(biāo)來(lái)尋找mda-7/IL-24基因抗腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移的可能機(jī)制。
　　方法:
　　構(gòu)建攜帶人mda-7/IL-24的重組腺病毒載體(Ad-mda-7);培養(yǎng)高轉(zhuǎn)移性人肝癌細(xì)胞H

2、CCLM6;將所培養(yǎng)的對(duì)數(shù)期細(xì)胞分組(1)實(shí)驗(yàn)組:用攜帶人mda-7/IL-24的重組腺病毒載體(Ad-mda-7)干預(yù)高轉(zhuǎn)移性人肝癌細(xì)胞HCCLM6(2)對(duì)照組:用PBS干預(yù)高轉(zhuǎn)移性人肝癌細(xì)胞HCCLM6;顯微鏡下觀察各組細(xì)胞的生長(zhǎng)增殖;用transwell分別檢測(cè)轉(zhuǎn)染MDA-7/IL-24基因組和PBS干預(yù)組,高轉(zhuǎn)移性人肝癌細(xì)胞HCCLM6侵襲力的不同;用RT-PCR分別檢測(cè)轉(zhuǎn)染MDA-7/IL-24基因組和PBS干預(yù)組各與侵襲轉(zhuǎn)移

3、相關(guān)的基因E-Cadherin,MMP-9和VEGF表達(dá)mRNA的表達(dá)水平;用Western Blot分別檢測(cè)轉(zhuǎn)染MDA-7/IL-24基因組和PBS干預(yù)組與侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)的基因E-Cadherin,MMP-9和VEGF表達(dá)蛋白的水平,分析各組蛋白水平的變化。
　　結(jié)果:
　　1.成功構(gòu)建重組腺病毒;
　　2.復(fù)制缺陷型腺病毒能介導(dǎo)外源基因MDA-7/IL-24在肝癌細(xì)胞中高效表達(dá);
　　3.重組腺病毒介導(dǎo)的mda

4、-7/IL-24基因能促使肝癌細(xì)胞凋亡.
　　4.重組腺病毒介導(dǎo)的mda-7/IL-24基因轉(zhuǎn)染的高轉(zhuǎn)移性人肝癌細(xì)胞HCCLM6與對(duì)照組相比較,其侵襲力有明顯下降.
　　5.與對(duì)照組相比MDA-7/IL-24能明顯抑制肝癌細(xì)胞中VEGF和MMP-9的mRNA的表達(dá),且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均小于0.05)。
　　6.與對(duì)照組相比MDA-7/IL-24能明顯促進(jìn)肝癌細(xì)胞中E-Cadherin的mRNA的表達(dá),且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P

5、均小于0.05)。
　　7.與對(duì)照組相比MDA-7/IL-24能明顯抑制肝癌細(xì)胞中VEGF和MMP-9蛋白的表達(dá),且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均小于0.05)。
　　8.與對(duì)照組相比MDA-7/IL-24能明顯促進(jìn)肝癌細(xì)胞中E-Cadherin蛋白的表達(dá),且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均小于0.05)。
　　結(jié)論:
　　復(fù)制缺陷型腺病毒載體Ad.mda-7能介導(dǎo)MDA-7/IL-24基因在高轉(zhuǎn)移性人肝癌細(xì)胞M6中高效表達(dá),促使肝癌細(xì)胞