兔踝關節(jié)外側韌帶重建術對韌帶本體感覺的影響.pdf

1、一、目的：
　　 對比觀察兔踝關節(jié)外側韌帶斷裂解剖重建術前后機械感受器小體的數(shù)量及S1脊神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元細胞表達的NT-3的變化，以探討兔踝關節(jié)外側韌帶斷裂解剖重建術對韌帶本體感覺影響。
　　 二、方法：
　　 1、選取21只成年新西蘭大白兔，隨機選擇3只，耳緣靜脈空氣栓塞處死后隨機取一側踝關節(jié)外側韌帶和同側S1背根神經(jīng)節(jié)，作為空白對照組。再隨機選取9只，均在韌帶中部隨機切斷一側踝關節(jié)外側韌帶，行Brostr(o)m

2、解剖重建術后縫合切口，作為實驗組；余下9只，均在韌帶中部隨機切斷一側踝關節(jié)外側韌帶，曠置切斷的韌帶后，作為對照組。兔俯臥位固定于實驗臺上，麻醉滿意后，消毒、鋪無菌巾。在實驗兔后肢作一長約3cm踝外側弧形切口，找到腓骨肌腱，使其脫位后，可找到連接外踝與跟骨前部的踝外側韌帶，尖刀切斷外側韌帶；實驗組使用3-0絲線行端端縫合；實驗對照組則將切斷的韌帶復位后，不縫合；復位腓骨肌腱，妥善固定后，縫合切口，并用無菌敷料包扎。術后不進行踝關節(jié)的固定，

3、讓其自由活動，普通喂養(yǎng)。每天肌注青霉素20萬U/d，連續(xù)3d，7天后拆線。
　　 2、分別于術后2周，6周和12周末耳緣靜脈空氣栓塞各處死3只實驗兔，取踝關節(jié)外側韌帶，將其放入生理鹽水沖洗后，按改良O'Connor and Gonzales(1979)氯化金染色法染色后，常規(guī)脫水、透明、石蠟包埋后，制備出5μm厚的連續(xù)切片，每隔200μm取一張片。光鏡下對機械感受器小體(Pacini小體、Ruffini小體、Golgi腱器官)進

4、行識別和計數(shù)。
　　 3、沿坐骨神經(jīng)逆行找到S1背根神經(jīng)節(jié)，切取后其用生理鹽水沖洗后，放入4％多聚甲醛內固定，再行脫水、透明、石蠟包埋。將各組背根神經(jīng)節(jié)組織塊連續(xù)性橫切，切片厚度為5μm，每個神經(jīng)節(jié)隨機取切片6張。用NT-3兔抗血清(滴度為1∶100)在同一條件下對各組切片行ABC免疫組織化學染色。光鏡下觀察和定量。
　　 4、所有數(shù)據(jù)均采用SPSS16.0軟件統(tǒng)計包進行分析，連續(xù)性正態(tài)分布的資料以((-x)±s)表示，

5、多組均數(shù)間比較采用One-Way Anova法，多組均數(shù)間的兩兩比較采用LCD法。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
　　 三、結果：
　　 1、在韌帶機械感受器小體數(shù)計數(shù)方面，三組之間的差別有統(tǒng)計學差異。兩兩比較示：空白對照組與實驗組、實驗對照組各時段均有統(tǒng)計學差異，空白對照組多于實驗組和實驗對照組；實驗組各時段之間與對照組一樣，均無統(tǒng)計學差異；實驗組各時段與實驗對照組各時段均有統(tǒng)計學差異，實驗組多于實驗對照組。

6、　　 2、在S1脊神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元NT-3表達方面，三組之間的差別有統(tǒng)計學意義。兩兩比較示：空白對照組與實驗組、實驗對照組各時段均有統(tǒng)計學差異，實驗組和實驗對照組各時段多于空白對照組；實驗組各時段之間與對照組一樣，均無統(tǒng)計學差異；實驗組各時段與實驗對照組各時段之間的差別無統(tǒng)計學差異。
　　 四、結論：
　　 1、兔踝關節(jié)外側韌帶斷裂后，不管手術與否，均會出現(xiàn)本體感覺功能下降；Brostr(o)m解剖重建術能最大限度的保留本