地黃提取物對(duì)早期阿霉素腎病大鼠的治療作用.pdf

1、目的： 1.研究地黃提取物對(duì)早期阿霉素腎病大鼠的血、尿生化及腎臟病理的影響。 2.研究地黃提取物對(duì)早期阿霉素腎病大鼠腎組織中TGF-β1及下游的Smads信號(hào)通路表達(dá)的影響。 方法： 1.動(dòng)物模型的制備與干預(yù)：成年雄性SD(Sprague-Dawlay)大鼠50只，隨機(jī)分為： (1)正常對(duì)照組(Z組，10只)：采用一次性經(jīng)尾靜脈注射等量生理鹽水。(2)模型組(40只)：采用大鼠尾靜脈內(nèi)一次性注射阿

2、霉素溶液，2周后腎病模型成立，達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)者為32只，隨后將模型組隨機(jī)分為：腎病模型對(duì)照組(M組，16只)、地黃提取物組(D組，16只)。D組于造模2周后開(kāi)始予2g/ml的地黃提取物(10g/Kg)每日一次灌胃，灌胃共8周；Z組和M組2周后每天予等量生理鹽水灌胃，灌胃共8周。 2.生化指標(biāo)檢測(cè)：大鼠實(shí)驗(yàn)前及實(shí)驗(yàn)2、4、6、8、10周末，留24小時(shí)尿液測(cè)定24小時(shí)尿蛋白含量，實(shí)驗(yàn)10周末取血測(cè)定血白蛋白、膽固醇、血尿素氮、血肌酐。

3、 3.腎臟病理學(xué)檢查：實(shí)驗(yàn)第10周末常規(guī)光鏡下及電鏡下作形態(tài)學(xué)觀察。 4.免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)大鼠腎臟組織中TGF-β1及Smad3、Smad7蛋白表達(dá)：采用SABC法免疫組織化學(xué)方法染色組織切片觀察各指標(biāo)的表達(dá)。 5.RT-PCR法檢測(cè)大鼠腎臟組織中TGF-β1及Smad3、Smad7的基因表達(dá)：余下腎臟組織保存于-80℃冰箱中，Trizol法提取其總RNA，RT-PCR法檢測(cè)腎臟組織內(nèi)TGF-β1及Smad3、

4、Smad7基因表達(dá)水平。 結(jié)果： 1.血液、尿液生化指標(biāo)比較：實(shí)驗(yàn)6周末，與M組比較，D組24h尿蛋白開(kāi)始明顯減少，有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.01)。實(shí)驗(yàn)10周末，與Z組比較，M組大鼠24h尿蛋白定量、TC、Scr和BUN水平均顯著上升，(p<0.01)，而血白蛋白則顯著降低(P<0.01)；與M組比較，D組大鼠24h尿蛋白定量、TC、Scr和BUN水平均顯著下降(p<0.05)，而血白蛋白則顯著升高(p<0.05)。

5、 2.病理結(jié)果：(1)光鏡下M組大鼠腎臟組織腎小球基本正常，腎小管上皮細(xì)胞腫脹，腎小囊擴(kuò)張，囊壁增厚，球囊粘連，部分腎小管管腔內(nèi)可見(jiàn)蛋白管型。(2)電鏡下可見(jiàn)到系膜區(qū)擴(kuò)張，系膜基質(zhì)增多，腎小球臟層上皮細(xì)胞廣泛足突變形、融合、足突間閉合連接形成，部分上皮細(xì)胞足突斷裂；D組大鼠腎組織病理改變明顯減輕。 3.腎組織免疫組織化學(xué)染色結(jié)果：M組大鼠腎皮質(zhì)內(nèi)TGF-β1、Smad3蛋白的表達(dá)較Z組明顯上調(diào)，而D組TGF-β1、Smad