2型糖尿病中影響血漿同型半胱氨酸水平的因素及其與血管并發(fā)癥的關(guān)系.pdf

1、糖尿病(DM)是一種嚴(yán)重影響人體健康的慢性疾病。糖尿病血管并發(fā)癥是糖尿病患者致死致殘的重要原因。血糖控制不佳，高血壓和血脂異常等是發(fā)生糖尿病血管并發(fā)癥的重要因素。近年來(lái)的研究表明同型半胱氨酸(Homocysteine,Hcy)與糖尿病關(guān)系密切，并且可能是參與糖尿病血管并發(fā)癥發(fā)生發(fā)展的重要因素。研究顯示Hcy作為一種反應(yīng)性血管損傷性氨基酸是心、腦、外周血管疾病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。但在糖尿病患者特別是2型糖尿病中，輕到中度的高同型半胱氨酸血癥(

2、HHcy)與2型糖尿病血管并發(fā)癥的關(guān)系，尚不肯定。另外2型糖尿病中胰島素抵抗、血糖控制及藥物治療對(duì)血漿tHcy的影響研究還很少。至今也沒(méi)有針對(duì)HHcy的干預(yù)治療是否影響糖尿病血管并發(fā)癥特別是微血管并發(fā)癥的發(fā)生發(fā)展的臨床和基礎(chǔ)研究。本研究的目的是從上述幾個(gè)方面探討Hcy與2型糖尿病及其血管并發(fā)癥的關(guān)系；并在動(dòng)物試驗(yàn)中初步研究降低tHcy治療對(duì)糖尿病腎臟病變的影響。本研究共四部分： 一、同型半胱氨酸與2型糖尿病及其血管并發(fā)癥關(guān)系的調(diào)

3、查【目的】研究影響2型糖尿病患者血漿同型半胱氨酸(tHcy)水平的因素，探討血漿tHcy與2型糖尿病血管并發(fā)癥的關(guān)系，并初步研究高同型半胱氨酸血癥(HHcy)致血管病變的可能機(jī)制?！痉椒ā?2個(gè)月內(nèi)在我院內(nèi)分泌門診和病房共調(diào)查了339例符合入選標(biāo)準(zhǔn)的2型糖尿病患者。取空腹血測(cè)定血FBS、血胰島素、HbA1c、CRP、纖維蛋白原、tHcy，餐后2小時(shí)取血測(cè)定PBS和胰島素。應(yīng)用HPLC測(cè)定空腹血漿tHcy水平。測(cè)尿Alb/Cr?！窘Y(jié)果】3

4、39例患者中合并大血管病變175例(51.6％)；并發(fā)DN169例(49.9％)，DR206例(60.8％)。血漿tHcy平均為15.1±11.5umol/L(中位數(shù)為12.4umol/L)。HHcy的患者共111例(32.7％)，其中tHcy≥30umol/L的患者20例(5.90％)。正常組和HHcy組之間BMI、SBP、FBS、HbA1c、LDL-ch、HDL-ch、Ch、TG、纖維蛋白原、CRP、尿Alb/Cr等均存在顯著差異(

5、p＜0.05)。無(wú)大血管病變和合并大血管病變的患者之間，年齡、DD、BMI、SBP、Ch、tHcy、纖維蛋白原、CRP、尿Alb/Cr存在顯著差異(P＜0.05)。本研究中，NAU組(129例，38.1％)，MiAU組(133例，39.2％)，MaAU組(77例，22.7％)三組間BMI、糖尿病病程、FBS、HbA1c等存在顯著差異(p＜0.05)；MiAU和MaAU組血漿tHcy、纖維蛋白原和CRP水平顯著高于NAU組，而且MaAU組

6、HHcy、高血壓、大血管合并癥及DR的發(fā)生率也顯著高于MiAU組和NAU組(p值均小于0.05)。無(wú)DR(131例，39.0％)，BDR組(161例，47.9％)，PDR組(44例，13.1％)三組間年齡、BMI、糖尿病病程、HbA1c等存在顯著差異(p＜0.05)；BDR和PDR組血漿tHcy、CRP和尿Alb/Cr水平顯著高于無(wú)DR組，PDR組的纖維蛋白原水平和HHcy及DN的發(fā)生率也顯著高于無(wú)DR組和BDR組(p＜0.05)。多元

7、逐步回歸分析顯示BMI、糖尿病病程、HbA1c、尿Alb/Cr、ISI與血漿tHcy水平獨(dú)立相關(guān)。血漿tHcy與大血管病變(OR=0.7328，P＜0.05)、DN(R=0.5851，p=0.001)、DR(OR=0.6407，p=0.001)獨(dú)立相關(guān)。Logistic回歸分析顯示CRP和纖維蛋白原與大血管病變(OR=0.179，P＜0.05；OR=0.8364,P＜0.05)，DN(OR=0.0297，p=0.001；OR=0.817

8、3,p=0.001)和DR(OR=0.1128,p=0.001；OR=0.8379,p=0.001)?！窘Y(jié)論】2型糖尿病患者中BMI、糖尿病病程、血糖控制水平和ISI是血漿tHcy的獨(dú)立相關(guān)因素；血漿tHcy可能是2型糖尿病患者大血管和微血管并發(fā)癥的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。 二、胰島素治療對(duì)2型糖尿病患者血漿tHcy及糖尿病腎臟病變的影響【目的】研究單純胰島素治療對(duì)2型糖尿病患者血漿同型半胱氨酸(tHcy)水平及對(duì)2型糖尿病腎臟病變發(fā)展的

9、影響?！痉椒ā?8例符合入選標(biāo)準(zhǔn)的2型糖尿病患者單純給予胰島素治療3個(gè)月?；€和治療3個(gè)月后取空腹血測(cè)定血FBs、HbA1c、CRP、tHcy，餐后2小時(shí)取血測(cè)定PBS。留尿查尿Alb/Cr、尿TGF-β1/Cr、尿NAG酶活性?！窘Y(jié)果】所有68例患者經(jīng)過(guò)3個(gè)月的單純胰島素治療后，F(xiàn)BS、PBs和HbA1c均比治療前顯著下降(p＜0.01)。雖然治療后血漿tHcy水平有下降趨勢(shì)，但沒(méi)有達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著水平(p＞0.05)。本研究中以HbA

10、1c7.0％作為判斷血糖控制水平的界值，其中治療后HbA1c≤7.0％的患者31例(45.6％)，HbA1c＞7.0％的患者37例(54.4％)。治療后HbA1c≤7.0％的患者，除FBS、PBS和HbA1c較治療前顯著下降外(p＜0.01)，tHcy、尿Alb/Cr、尿TGF-β1也比治療前顯著降低(p＜0.01)。Pearson相關(guān)分析顯示，胰島素治療后，血漿tHcy的變化與糖尿病病程、治療前BMI、PBS、HbA1c、tHcy、C

11、RP、尿Alb/Cr、尿TGF-β1、尿NAG酶相關(guān)(p＜0.05)，治療后與治療前血漿tHcy的差值也與治療后BMI、FBS、HbA1c、tHcy、尿TGF-β1、尿NAG酶相關(guān)(p＜0.05)，同時(shí)與治療前后BMI、FBS、HbA1c、CRP、尿Alb/Cr、尿TGF-β1、尿NAG酶的差值相關(guān)(p＜0.05)。多元線性逐步回歸分析，血漿tHcy的變化僅與CRP(r=0.191,p=0.044)、尿TGF-β1(r=0.538,p=

12、0.001)、尿NAG酶(r=0.193,p=0.013)的差值獨(dú)立相關(guān)。治療前后尿Alb/Cr(r=0.591,p=0.001)、尿TGF-β1(r=0.632,p=0.001)、尿NAG酶(r=0.519,p=0.001)的變化僅與胰島素治療前后血漿tHcy獨(dú)立相關(guān)?！窘Y(jié)論】胰島素強(qiáng)化治療可能通過(guò)改善血糖控制降低2型糖尿病患者血漿tHcy水平，從而延緩糖尿病腎臟病變的發(fā)展。 三、高脂飲食誘導(dǎo)的胰島素抵抗對(duì)大鼠血漿同型半胱氨酸

13、水平的影響【目的】研究高脂飲食誘導(dǎo)的胰島素抵抗(insulinresistance，IR)大鼠血漿同型半胱氨酸(Homocysteine，Hcy)的影響，及胰島素增敏劑-吡格列酮對(duì)胰島素抵抗(insulinresistance，IR)大鼠血漿tHcy的作用。【方法】將24只Wistar大鼠隨機(jī)分為3組：對(duì)照組給予普通飼料喂養(yǎng)；胰島素抵抗組：喂高脂飼料誘導(dǎo)胰島素抵抗動(dòng)物模型；吡格列酮組：鹽酸吡格列酮組在喂飼高脂飼料的同時(shí)，灌胃給鹽酸吡格列

14、酮10mg/kg/天。各組飼養(yǎng)11周時(shí)，分別做空腹血糖、葡萄糖耐量實(shí)驗(yàn)和胰島素耐量實(shí)驗(yàn)后處死動(dòng)物。測(cè)定血糖和胰島素水平，用HOMA模型評(píng)價(jià)胰島素抵抗指數(shù)。飼養(yǎng)11周后測(cè)定血漿tHcy水平。【結(jié)果】試驗(yàn)后三組間體重變化、空腹胰島素、空腹血糖、胰島素抵抗指數(shù)均有顯著差異(p＜0.05)。其中吡格列酮組空腹胰島素、空腹血糖、胰島素抵抗指數(shù)(insulinresistanceindex，IRI)均顯著低于高脂組(p＜0.01)。試驗(yàn)后三組間血漿

15、tHcy也有顯著差異，高脂組(35.7±14.1umol/L)高于對(duì)照組(9.95±2.40umol/L)和吡格列酮組(8.8±1.39umol/L)。相關(guān)分析顯示糖耐量試驗(yàn)血糖曲線下面積(AUC)、空腹胰島素、空腹血糖、胰島素抵抗指數(shù)、內(nèi)臟脂肪含量均與血漿tHcy水平顯著相關(guān)(p＜0.05)。進(jìn)一步多元逐步回歸分析顯示僅空腹血糖(r=0.504，p=0.031)和胰島素抵抗指數(shù)與血漿tHcy相關(guān)(r=0.302，p=0.046)?！窘Y(jié)

16、論】高脂誘導(dǎo)的胰島素抵抗同時(shí)表現(xiàn)為大鼠血漿tHcy水平升高，而胰島素增敏劑-吡格列酮可能通過(guò)減輕胰島素抵抗從而降低血漿tHcy濃度。 四、比較氰鈷胺和彌可保(R)對(duì)伴高同型半胱氨酸血癥的2型糖尿病小鼠腎臟病變的影響【目的】：觀察并比較氰鈷胺和甲鈷胺(彌可保(R)，甲基B12)注射對(duì)高蛋氨酸喂養(yǎng)誘發(fā)的高同型半胱氨酸血癥的2型糖尿病小鼠(KKaymice)血清tHcy水平及糖尿病腎臟病變的影響。【方法】：給予成模的65只4周齡的2型

17、糖尿病小鼠喂養(yǎng)含3％蛋氨酸的高脂飼料8周，建立高同型半胱氨酸(HHcy)2型糖尿病小鼠模型。將小鼠隨機(jī)分為三組：對(duì)照組(n=22)、氰鈷胺組(n=22)、甲鈷胺組(n=21)，并繼續(xù)給予高蛋氨酸高脂飲食。腹腔注射生理鹽水、氰鈷胺或甲鈷胺0.2mg/kg，隔日一次。分別于注射藥物后1、2、4、8周取血測(cè)定血清tHcy(ELISA,DPC試劑盒)。治療前和治療后2、4、8周用代謝籠收集小鼠24小時(shí)尿(甲苯防腐)，測(cè)定尿白蛋白(ELISAAl