慢性飲酒大鼠肺組織CTGF和TIMP-1的表達(dá)及意義.pdf

1、目的:隨著生活水平的提高、生活節(jié)奏的加快與工作壓力的加大,酒精消費(fèi)量與飲酒人數(shù)都在逐年上升,慢性飲酒已成為嚴(yán)重影響人類健康的重要因素之一。WHO2006年的一份報(bào)告顯示過(guò)度飲酒與60多種疾病有關(guān),飲酒可導(dǎo)致妊娠女性和新生兒疾病、癌癥、神經(jīng)精神疾病、心血管疾病、肝硬化、肺損傷、意外損傷等,酒精與人體健康的關(guān)系已成研究的熱點(diǎn)。酒精對(duì)人類的幾乎每個(gè)器官系統(tǒng)都有潛在的生物學(xué)效應(yīng),其中酒精對(duì)肺組織也有一定影響,其代謝特點(diǎn)及揮發(fā)性使得氣道上皮處于高

2、乙醇濃度下,長(zhǎng)期處于這種環(huán)境下可以造成氣道上皮損傷和肺組織重構(gòu),而導(dǎo)致酒精相關(guān)性肺病。目前對(duì)酒精能否引起肺纖維化的研究很少,本研究旨在通過(guò)建立慢性飲酒大鼠模型,觀察肺組織中谷胱甘肽、羥脯氨酸含量及結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)、基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑-1(TIMP-1)的表達(dá),以探討酒精與肺纖維化之間的關(guān)系及可能的機(jī)制,進(jìn)一步尋找肺纖維化的可能致病因素,使人們對(duì)酒精的危害有進(jìn)一步了解。
　　 方法:根據(jù)Lieber-DeCarli酒

3、精液體飼料配方配制含酒精和不含酒精而熱卡相同的液體飼料。健康雄性SPF級(jí)Sprague-Dawley大鼠20只,體重160-200g,隨機(jī)分成對(duì)照組(C組)10只,每日給定量無(wú)酒精液體飼料單籠喂養(yǎng)；酒精組(A組)10只,每日給定量酒精液體飼料單籠喂養(yǎng),不再提供飲水。各組動(dòng)物均于8周后麻醉處死,開(kāi)胸分離完整氣管和肺組織,右肺通過(guò)蘇木素-伊紅染色觀察肺組織的形態(tài)變化,通過(guò)Masson染色觀察肺間質(zhì)中膠原沉積的情況,用比色法計(jì)算大鼠肺組織中的

4、谷胱甘肽和羥脯氨酸的含量、通過(guò)Elisa檢測(cè)肺組織中結(jié)締組織生長(zhǎng)因子、基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑-1的表達(dá)。應(yīng)用SPSS15.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,計(jì)數(shù)資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,組間比較采用t檢驗(yàn),選擇P<0.05(雙側(cè))為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果:
　　 1、一般狀態(tài):實(shí)驗(yàn)前大鼠一般狀況良好,正常進(jìn)食、排球狀干爽便,皮毛順滑有光澤。實(shí)驗(yàn)后各組大鼠攝食無(wú)顯著差別,酒精組的大鼠體重增長(zhǎng)緩慢,毛色枯黃,有脫毛、行動(dòng)遲緩,排不

5、成形稀便,易激惹。
　　 2、HE染色結(jié)果顯示:對(duì)照組肺泡結(jié)構(gòu)清晰,肺泡壁及間質(zhì)內(nèi)無(wú)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。酒精組可見(jiàn)不同程度的肺泡及肺泡間隔炎性細(xì)胞浸潤(rùn),部分肺泡壁破壞、塌陷,間隔增寬,膠原沉積。Masson染色結(jié)果示:酒精組較對(duì)照組在肺泡間隔中膠原纖維沉積增多。
　　 3、比色法測(cè)定結(jié)果顯示:與對(duì)照組比較,酒精組肺組織谷胱甘肽(GSH)含量減少；酒精組肺組織羥脯氨酸(HYP)含量增加,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

6、>　　 4、Elisa實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:與對(duì)照組比較,酒精組肺組織結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)、基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑-1(TIMP-1)表達(dá)量升高,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　 結(jié)論:本實(shí)驗(yàn)證明用Lieber-DeCarli酒精液體飼料可以建立慢性飲酒大鼠動(dòng)物模型,慢性飲酒可以引起大鼠肺組織谷胱甘肽減少,使肺組織的氧化抗氧化系統(tǒng)失衡,發(fā)生氧化應(yīng)激反應(yīng)；氧化應(yīng)激產(chǎn)物一方面促進(jìn)肺成纖維細(xì)胞釋放大量促纖因子CTGF,另一方