表皮神經纖維密度正常參考值的確定及皮膚神經活檢用于周圍神經病診斷的研究.pdf

1、目的：1、建立皮膚神經活檢的方法學，確定我實驗室表皮神經纖維密度的正常參考值。2、研究周圍神經病變時皮膚神經病理的改變，比較表皮神經纖維密度與臨床表現、神經電生理及腓腸神經活檢結果的一致性。3、研究糖尿病周圍神經病時皮膚神經病理的改變及糖尿病周圍神經病的相關危險因素。4、研究痛性周圍神經病變時皮膚神經病理的改變及探討可能的發(fā)病機制。 方法：1、招募10名健康志愿者，分別取大小腿皮膚，進行蛋白基因產物9.5(9.5，PGP9.5)

2、、血管活性腸肽(VIP)、P物質(SP)、降鈣素基因相關肽(CGRP)的免疫組化染色，計算表皮神經纖維密度(IENFD)的正常參考值，明確真皮神經叢及皮膚附屬器的神經支配，確定VIP、SP、CGRP陽性纖維的分布和數量。2、對65例周圍神經病病人行皮膚神經活檢，進行PGP9.5及各種神經肽的免疫組化染色，計算INEFD，并觀察神經纖維形態(tài)。對每例病人進行詳細的神經系統(tǒng)查體和感覺體征嚴重程度評分。其中57例患者做常規(guī)肌電圖及神經傳導速度N

3、CV)檢查，40例做皮膚交感反射(SSR)檢查，18例行腓腸神經活檢，對這些檢查結果的一致性進行分析。3、分析26例糖尿病周圍神經病變患者皮膚神經病理改變的特點，探討IENFD與病程及血糖、糖化血紅蛋白的相關性。4、對27例痛性周圍神經病病人進行臨床特點分析，比較疼痛及無痛患者IENFD及SP、CGRP陽性神經纖維數目的改變。 結果：1、用PGP9.5標記神經纖維，可見正常人表皮、真皮及皮膚附屬器有豐富的神經纖維支配。我實驗室I

4、ENDF正常值：大腿為21.44±2.73根/mm，小腿為15.44±2.20根/mm，與國外各實驗室正常值相近似；大腿比小腿的表皮神經纖維密度約高40％。VIP陽性纖維表達于立毛肌、汗腺腺泡及導管；SP及CGRP陽性纖維分布于表皮及真皮層神經叢，神經纖細，數量少；CGRP陽性纖維多于SP陽性纖維。2、周圍神經病病人與健康志愿者相比，大小腿IENFD均有減少，差異有統(tǒng)計學意義。65例病人中，50例(76.9％)出現IENFD的異常，24

5、例伴神經形態(tài)的改變；SCV異常者47.4％，SSR異常者62.5％。在小纖維神經病病人中，IENFD異常61.3％，SSR異常38.9％。在有大纖維受累的病人中，IENFD異常91.2％，SCV異常79.4％。小腿IENFD下降的嚴重程度與臨床感覺癥狀評分相一致，與SCV異常相一致。腓腸神經總有髓纖維密度及大、小有髓纖維密度與小腿IENFD均高度相關(r=0.576、0.560、0.524，P=0.020、0.024、0.037)。3、

6、糖尿病病人小腿IENFD與病程負相關(r=-0.517，P=0.346)，與血糖無相關性(r=-0.223，P=0.346)，與糖化血紅蛋白無相關性(r=-0.227，P=0.588)。糖耐量異常及糖尿病病人可在周圍神經癥狀之前出現IENFD的下降。4、小腿IENFD在疼痛組病人(6.54±6.51根/mm)及無疼痛組病人(8.54±6.09根/mm)差異無顯著性意義(P>0.05)；SP陽性纖維在疼痛組(2.18±2.30根/4.5m

7、m)較無疼痛組(5.23±4.00根/4.5mm)顯著減低(P<0.05)；CGRP陽性纖維在疼痛組病人(12.56±8.48根/mm)較無疼痛組(21.04±10.33根/mm)顯著減低(P<0.05)。 結論：1、皮膚神經活檢簡單安全，PGP9.5免疫組化染色計算IENFD方法可靠。SP、CGRP及VIP陽性纖維有不同的分布，可用于不同類型神經纖維的鑒別。2、皮膚神經病理檢查可用于小纖維神經病的早期診斷，可以發(fā)現無癥狀的周圍

8、神經病患者。除可出現IENFD的改變外，神經纖維形態(tài)的改變也可提供診斷價值。皮膚神經活檢可以觀察遠近端神經支配的不同。IENFD下降程度與SCV異常及有髓神經纖維密度減低相一致，對于感覺為主的周圍神經病，皮膚神經活檢較腓腸神經活檢更敏感。3、糖尿病周圍神經病患者IENFD下降，即使無癥狀患者也可以有IENFD的下降，提示皮膚神經活檢可以發(fā)現早期臨床下的糖尿病周圍神經病。隨糖尿病病程的延長，表皮神經纖維脫失程度逐漸加重。4、有疼痛組病人S