環(huán)孢霉素A免疫全抗原合成及檢測用單克隆抗體制備研究.pdf

1、環(huán)孢霉素A(CsA)作為一種高效的免疫抑制劑,多年來一直被臨床廣泛用于各種器官移植和自身免疫性疾病,但由于其具有特殊的藥動學(xué)和藥效學(xué)特點(diǎn),化療指數(shù)小,監(jiān)測其血藥濃度對于指導(dǎo)臨床合理用藥具有十分重要的意義.在監(jiān)測方法技術(shù)研究中,現(xiàn)在一般常用的檢測方法以高效液相色譜法(HPLC)為主,但由于其所需設(shè)備及人員等條件相對較高,不利于在各級醫(yī)院推廣.探索研究一種相對精確度高且簡便快速的血藥濃度監(jiān)測方法具重要的經(jīng)濟(jì)和社會效益.免疫標(biāo)記技術(shù)由于具有突

2、出的優(yōu)點(diǎn)而被廣泛應(yīng)用.該方法以抗原抗體反應(yīng)為基礎(chǔ),獲得高特異性抗體是其應(yīng)用前提.CsA是半抗原分子,不具有免疫原性,必須將其與載體蛋白或聚合多肽偶聯(lián)以獲得免疫全抗原,在此基礎(chǔ)上才能免疫動物制備抗體.該研究以碘嫁燈為紫外光源,丙酮為反應(yīng)溶劑,利用光化學(xué)反應(yīng)實(shí)現(xiàn)了CsA與光敏劑4-苯甲酰苯甲酸(BBa)的提氫-偶合及光環(huán)化加成反應(yīng),獲得了較好收率的中間體CsA-BBa共軛物,在CsA分子上引入了活性羧基,再利用羧基與氨基反應(yīng)將CsA與免疫原