CIN及子宮頸鱗癌中ATP7B、Kiss-1、Skp2的表達和臨床意義.pdf

1、目的:子宮頸癌是女性生殖系統(tǒng)三大惡性腫瘤之一。國內外科研人員普遍認為,子宮頸鱗癌的發(fā)生、發(fā)展、浸潤和轉移是一個多種因素共同參與的多步驟、多基因調控的復雜過程,其中包括原癌基因的激活,抑癌基因的失活和轉運蛋白的功能失調等。
　　 P型銅轉運ATP酶β鏈(ATP7B)是銅離子轉運蛋白家族成員之一。近年來有研究顯示,ATP7B在乳腺癌、胃癌、食管癌、肝癌及子宮內膜癌組織中均有不同程度的高表達。提示ATP7B過度表達可能在惡性腫瘤的癌變

2、過程中發(fā)揮促進作用。Kiss-1基因是Lee等[2]1996年發(fā)現(xiàn)的一種新的腫瘤轉移抑制基因。它定位于染色體lq3-2,Kiss-1基因在細胞生長中起負調節(jié)作用,抑制增殖、促進細胞分化成熟,與衰老及引發(fā)多余細胞進入程序性細胞死亡有關。Skp2(S-phase kinase-associated protein2)是人類F-box蛋白家族成員之一,是泛素蛋白連接酶復合物(SCF)底物識別亞單位。一系列研究提示Skp2是一種潛在的原癌基因,

3、它在細胞周期中起重要作用,特別是在G1/S期轉變時,可通過參與調控因子的泛素依賴性蛋白水解途徑來調控細胞周期。Skp2激活后即參與促進細胞增殖和細胞癌變過程,其在細胞生長中的作用與Kiss-1相反。
　　 本課題采用組織芯片技術及免疫組化方法檢測ATP7B、Kiss-1及Skp2在子宮頸不同程度病變組織中的表達情況。研究ATP7B、Kiss-1及Skp2與子宮頸不同程度病變的關系及臨床病理意義。分析子宮頸鱗癌中ATP7B、Kis

4、s-1及Skp2三者的表達有無相關性。這對了解宮頸鱗癌的發(fā)病機制;預測宮頸鱗癌的浸潤、轉移;指導子宮頸鱗癌的臨床診斷和治療具有重要意義。
　　 方法:
　　 1選取河北省人民醫(yī)院病理科2008年8月～2009年7月間手術切除及活檢的子宮頸組織標本196例,制成組織芯片共得到175例有效樣本,其中正常子宮頸鱗狀上皮24例,CIN病變103例(CINⅠ34例,CINⅡ36例,CINⅢ33例),子宮頸鱗癌48例。
　　

5、 2應用組織芯片技術及免疫組化方法(SP法)檢測正常子宮頸鱗狀上皮、CIN組織及子宮頸鱗癌中ATP7B、Kiss-1及Skp2的表達。
　　 3采用SPSS16.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學處理,以α=0.05為檢驗水準,當P＜0.05時具有統(tǒng)計學意義。計數(shù)資料計算陽性率,樣本率之間的比較采用卡方檢驗,兩變量之間相關性檢驗采用Spearman等級相關分析。
　　 結果:
　　 1制備組織芯片及染色結果
　　 按課

6、題要求制作芯片4張(7×7),4個位點缺失,15個位點組織無意義。其他位點均可見足夠的組織結構。共得有效樣本175例,其中子宮頸鱗癌組48例,CIN組103例(CINⅠ34例,CINⅡ36例,CINⅢ33例),正常宮頸組織24例。HE染色均勻,無脫片、異位和皺折,顯示組織著色良好。免疫組化染色,陽性定位清楚,背景干凈,無掉片現(xiàn)象。
　　 2 ATP7B在子宮頸上皮不同程度病變組織中的表達
　　 從正常子宮頸鱗狀上皮組織8

7、.3％(2/24)到CINⅠ17.6％(6/34)、CINⅡ30.5％(11/36)、CINⅢ54.5％(18/33)再到子宮頸鱗癌75％(36/48),ATP7B的陽性表達率逐漸升高,其差異具有統(tǒng)計學意義(p＜0.05)。ATP7B在子宮頸鱗癌及CINⅢ、CINⅡ中的陽性表達率均高于正常宮頸鱗狀上皮及CINⅠ組,差異有統(tǒng)計學意義(p＜0.05);子宮頸鱗癌、CINⅢ之間差異無統(tǒng)計學意義(p＞0.05);正常子宮頸鱗狀上皮與CINⅠ之間

8、差異有統(tǒng)計學意義(p＜0.05)。
　　 3 Kiss-1在宮頸上皮不同程度病變組織中的表達
　　 Kiss-1從正常子宮頸鱗狀上皮91.6％(22/24)到CINⅠ79.4％(27/34)、CINⅡ61.1％(22/36)、CINⅢ54.5％(18/33)再到子宮頸鱗癌31.2％(15/48)陽性表達率逐漸降低。Kiss-1在子宮頸鱗癌及各級別CIN中的表達均低于正常子宮頸鱗狀上皮,差異有統(tǒng)計學意義(p＜0.05);K

9、iss-1在子宮頸鱗癌中的表達明顯低于各級別CIN(p＜0.05);各級別CIN之間,差異也有統(tǒng)計學意義(p＜0.05),隨級別增加表達降低。
　　 4 Skp2在子宮頸上皮不同程度病變組織中的表達
　　 從正常子宮頸鱗狀上皮組織0％(0/24)到CINⅠ44.1％(15/34)、CINⅡ63.9％(23/36)、CINⅢ89.9％(29/33)再到子宮頸鱗癌95.5％(46/48),Skp2陽性表達率逐漸增加,其差異具

10、有統(tǒng)計學意義(p＜0.05)。Skp2在子宮頸鱗癌及CINⅢ、CINⅡ中的陽性表達率均高于正常子宮頸鱗狀上皮及CINⅠ組,差異有統(tǒng)計學意義(p＜0.05);子宮頸鱗癌與CINⅢ之間差異無統(tǒng)計學意義(p＞0.05);正常宮頸鱗狀上皮與CINⅠ之間差異有統(tǒng)計學意義(p＜0.05)。各級別CIN之間Skp2的表達也存在顯著性差異(p＜0.05),隨級別增加表達增強。
　　 5子宮頸鱗癌中ATP7B、Kiss-1及Skp2的表達相關性分

11、析
　　 子宮頸鱗癌中ATP7B、Kiss-1及Skp2的表達之間均無顯著相關性(p＞0.05),rATP7B與Kiss-1=-0.856,rATP7B與Skp2=0.361,rskp2與Kiss-1=-0.309。
　　 6子宮頸鱗癌組織中ATP7B、Kiss-1及Skp2的表達與年齡、腫瘤大小、分化程度、臨床分期、淋巴結轉移情況之間的關系
　　 Skp2的表達與年齡、腫瘤大小、分化程度、臨床分期、淋巴結轉移情

12、況之間均無顯著相關性(p＞0.05)。ATP7B的表達與年齡、腫瘤大小、分化程度均無顯著相關性(p＞0.05),ATP7B的表達與臨床分期、淋巴結轉移情況之間有顯著相關性(p＜0.05)。Kiss-1的表達與年齡、腫瘤大小、分化程度無顯著相關性(p＞0.05)。Kiss-1的表達與臨床分期、淋巴結轉移情況之間有顯著相關性(p＜0.05)。
　　 結論:
　　 1用免疫組化方法檢測ATP7B,其陽性表達率從正常子宮頸鱗狀上

13、皮到CIN再到子宮頸鱗癌逐漸增高,其差異有統(tǒng)計學意義(p＜0.05)。提示ATP7B可能在子宮頸鱗癌發(fā)生發(fā)展過程中起了促進作用。檢測ATP7B可為子宮頸鱗癌、CIN的鑒別診斷提供參考。
　　 2 Kiss-1陽性表達率從正常子宮頸鱗狀上皮、CIN到子宮頸鱗癌逐漸降低,其差異具有統(tǒng)計學意義(p＜0.05)。證實Kiss-1的失活促進正常子宮頸鱗狀上皮細胞的癌變。檢測Kiss-1有助于對CIN病變進行更客觀準確的分級及與子宮頸鱗癌的

14、鑒別診斷。
　　 3 Skp2的陽性表達率從正常子宮頸鱗狀上皮、CIN到子宮頸鱗癌逐漸增高,其差異具有統(tǒng)計學意義(p＜0.05)。支持Skp2激活后參與促進細胞增殖和細胞癌變。檢測Skp2同樣有助于子宮頸鱗癌及CIN的鑒別診斷。
　　 4子宮頸鱗癌中ATP7B、Kiss-1及Skp2的表達之間無顯著相關性。不支持它們在子宮頸鱗癌的發(fā)生、發(fā)展中起協(xié)同作用。
　　 5 ATP7B在子宮頸鱗癌Ⅱ期患者中的表達高于Ⅰ期,

15、其差異具有統(tǒng)計學意義(p＜0.05);在子宮頸鱗癌淋巴結有轉移患者中的表達高于無轉移的患者,差異具有統(tǒng)計學意義(p＜0.05)。Kiss-1在子宮頸鱗癌Ⅱ期患者中的表達低于Ⅰ期,差異具有統(tǒng)計學意義(p＜0.05):在子宮頸鱗癌淋巴結有轉移患者中的表達低于無轉移者,差異具有統(tǒng)計學意義(p＜0.05)。提示抑癌基因-Kiss-1的表達缺失以及銅轉運蛋白的表達增加在子宮頸鱗癌的浸潤和轉移中起促進作用。對Kiss-1及ATP7B的檢測有助于深入