閩江流域病原性大腸桿菌Ⅰ型整合子檢測及抗藥性分析.pdf

1、隨著抗生素的廣泛及不規(guī)范使用，細(xì)菌的耐藥特別是多重耐藥問題日趨嚴(yán)重。而獲得外源性耐藥基因是大多數(shù)細(xì)菌產(chǎn)生耐藥性的原因。具有捕獲及表達(dá)外來耐藥基因能力的整合子-基因盒系統(tǒng)作為新的細(xì)菌耐藥性傳播機(jī)制正越來越受關(guān)注?；蚝惺切〉目梢苿拥拿撗鹾颂呛怂酓NA分子，攜帶耐藥基因，通常整合到整合子中轉(zhuǎn)錄；整合子是保守、可移動的轉(zhuǎn)座子樣DNA元件，可以整合耐藥基因在細(xì)菌之間水平傳播，對于細(xì)菌間耐藥基因的擴(kuò)散和多重耐藥性的產(chǎn)生起重要作用。 本文主

2、要研究了分離自閩江流域的病原性大腸桿菌Ⅰ類整合子的分布情況、其攜帶耐藥基因盒種類和結(jié)構(gòu)情況，以及與耐藥性的關(guān)系。方法使用整合酶基因擴(kuò)增法檢測Ⅰ類整合子，再擴(kuò)增部分陽性菌株的基因盒插入?yún)^(qū)，并結(jié)合限制性片段長度多態(tài)性分析(RFLP)和DNA測序技術(shù)分析整合子可變區(qū)基因盒的種類和排列。并依據(jù)NCCLS(2003)推薦的紙片擴(kuò)散法測定了200株大腸桿菌對20種抗生素的耐藥性。 在500株大腸埃希菌中檢出209株為第Ⅰ類整合酶基因陽性，占

3、41.8％。藥敏實驗表明，所有供試菌株均有不同程度的耐藥性，最少的抗2種抗生素，最高則達(dá)到抗16種。Ⅰ型整合子與大腸桿菌的耐藥性呈正相關(guān)，即整合子陽性菌比整合子陰性菌有更強的耐藥性。 耐藥基因盒擴(kuò)增結(jié)果顯示：37.5％(15/40)整合子陽性菌株可變區(qū)擴(kuò)增陽性，擴(kuò)增片段大小為0.6～2kb；大小相同的Ⅰ類整合子有相同的酶切圖譜，共檢出4種不同的可變區(qū)。可變區(qū)基因盒排列分別為：addA1(編碼氨基糖苷類耐藥性)；dfrA1-aad