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1、細(xì)菌耐藥性問題已經(jīng)成為全球關(guān)注的一個(gè)熱點(diǎn)。大腸桿菌作為人和動(dòng)物體內(nèi)的常在菌,其耐藥水平的高低具有一定的代表性。存在于細(xì)菌質(zhì)粒中的整合子結(jié)構(gòu),能夠整合各種耐藥基因盒并在同種或不同種細(xì)菌間進(jìn)行水平傳播,進(jìn)而引起細(xì)菌耐藥性普遍升高和多重耐藥日趨嚴(yán)重的現(xiàn)狀。因此了解規(guī)?;B(yǎng)豬場(chǎng)大腸桿菌的耐藥水平,研究Ⅰ型整合子的的類型及其流行狀況,分析其耐藥基因盒與多重耐藥現(xiàn)象之間的關(guān)系,為了解細(xì)菌耐藥性現(xiàn)狀,指導(dǎo)臨床合理用藥以及針對(duì)目前耐藥現(xiàn)狀制定防控措施提
2、供試驗(yàn)依據(jù)。
本研究采用微量肉湯稀釋法測(cè)定159株豬源大腸桿菌對(duì)8類14種抗菌藥物的耐藥性。試驗(yàn)結(jié)果表明:159株大腸桿菌對(duì)四環(huán)素、磺胺異惡唑、新諾明的耐藥率最高,為100%;所有菌株對(duì)奧格門丁均表現(xiàn)為敏感;而對(duì)頭孢唑啉、頭孢噻呋和多粘菌素的耐藥率較低,分別為5.03%(8株)、5.66%(9株)和2.52%(2株)。多重耐藥范圍為3耐~11耐。其中以7耐為最多,耐藥菌株的比例占到24.44%,其次分別為9耐、8耐、6耐、
3、5耐,耐藥菌株的比例分別為17.94%、17.15%、12.93%、12.66%。
本試驗(yàn)采用PCR方法調(diào)查豬源大腸桿菌Ⅰ型整合子的流行病學(xué),以擴(kuò)增出5'端的保守序列Ⅰ型整合酶基因(int(I)1基因)為判定存在Ⅰ型整合子的依據(jù)。采用PCR方法、PCR產(chǎn)物同源性酶譜分析及直接測(cè)序三種方法結(jié)合進(jìn)行耐藥基因盒的調(diào)查。研究得出:從豬場(chǎng)分離的119株大腸桿菌中,共92株分離菌有Ⅰ型整合子整合酶基因及耐藥基因盒插入?yún)^(qū)擴(kuò)增片段,檢出率
4、達(dá)77.31%。92株Ⅰ型整合子攜帶大腸桿菌共擴(kuò)增出7類不同大小的基因盒插入?yún)^(qū)片段,大小分別為1008bp、1318bp、1586bp、1663bp、1913bp、1945bp、3149bp,其中以大小為1008bp的插入?yún)^(qū)片段的檢出率最高為31.67%。而檢出率最低的為長(zhǎng)度為1318bp的基因盒插入?yún)^(qū)。將基因盒插入?yún)^(qū)擴(kuò)增片段的測(cè)序結(jié)果與Genebank中的相關(guān)序列進(jìn)行比對(duì),分析其攜帶基因盒的同源性。試驗(yàn)檢測(cè)的Ⅰ型整合子攜帶的耐藥基因?yàn)?/p>
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