留蘭香油對博萊霉素或吸煙-脂多糖引起的肺纖維化改變及α-SMA表達(dá)的影響.pdf

1、目的：
　　 觀察留蘭香油對博萊霉素引起的小鼠肺纖維化及吸煙和脂多糖引起的大鼠COPD合并肺纖維化改變及α-SMA表達(dá)的影響。
　　 方法：
　　 (1)ICR小鼠分為六組：①正常對照組；②模型組；③留蘭香油14mg·kg-1組；④留蘭香油42mg·kg-1組；⑤留蘭香油140mg·kg-1組；⑥醋酸潑尼松1.3mg·kg-1組。氣道內(nèi)一次性滴入博萊霉素建立肺纖維化模型，實(shí)驗(yàn)動物分為留蘭香油治療組和預(yù)防組，分別于

2、造模后第8天和第1天開始給予留蘭香油灌胃3周和4周。每7天記錄小鼠體重、死亡率；肺組織切片行HE、Masson染色觀察氣道炎癥及纖維化程度，對病理圖像進(jìn)行形態(tài)學(xué)測量分析；測定肺組織中羥脯氨酸(hydroxyproline)、TNF-α、TGF-β1、MMP-9及TIMP-1含量；測定肺組織中α-SMA表達(dá)水平。所有數(shù)據(jù)使用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。
　　 (2)SD大鼠隨機(jī)分為六組：①正常對照組；②COPD合并肺纖維化模

3、型組；③留蘭香油30mg·kg-1組；④留蘭香油100mg·kg-1組；⑤留蘭香油300mg·kg-1組；⑥地塞米松0.01mg·kg-1組。反復(fù)被動吸煙和氣道內(nèi)滴入脂多耱12周建立大鼠COPD合并肺纖維化模型，留蘭香油灌胃治療4周。觀察大鼠COPD合并肺纖維化模型病理學(xué)變化，肺組織病理切片行Masson三色染色觀察氣道纖維化程度，對病理圖像進(jìn)行形態(tài)學(xué)測量分析，ELISA檢測肺組織中MCP-1和TGF-β1水平，免疫組化法測定肺組織α-

4、SMA表達(dá)水平。所有數(shù)據(jù)使用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。
　　 結(jié)果：
　　 (1)模型組小鼠滴入博萊霉素后第7天體重較正常組明顯減輕(P<0.01)。留蘭香油治療組小鼠體重亦減輕，較模型組均無差異；留蘭香油預(yù)防組體重均增加且42、140mg·kg-1組較模型組有顯著性差異(P<0.05，P<0.01)。
　　 (2)模型組小鼠支氣管周圍、肺泡間隔有大量的炎癥細(xì)胞浸潤。留蘭香油14、42、140mg·kg-

5、1治療組和預(yù)防組小鼠炎癥細(xì)胞浸潤相比模型組均無明顯減輕。
　　 (3)模型組小鼠肺泡間隔明顯增厚，肺泡結(jié)構(gòu)被破壞，支氣管周圍及肺泡間隔中有大量的藍(lán)色膠原纖維沉積(P<0.001)。留蘭香油治療組小鼠與模型組相比無明顯減少；留蘭香油14、42、140mg·kg-1預(yù)防組小鼠與模型組相比膠原沉積明顯減輕(P<0.001，P<0.05，P<0.001)，肺泡結(jié)構(gòu)仍有部分保留，膠原沉積主要在支氣管周圍，肺泡間隔的膠原沉積減少。
　

6、　 (4)模型組小鼠肺組織中羥脯氨酸較正常組明顯增高(P<0.01)。留蘭香油治療組與模型組相比無明顯減少；留蘭香油14、140mg·kg-1預(yù)防組小鼠肺組織中羥脯氨酸水平較模型組明顯降低(P<0.01)。
　　 (5)ELISA結(jié)果：模型組小鼠肺內(nèi)TNF-α、TGF-β1、MMP-9和TIMP-1含量較正常組均明顯升高。留蘭香油治療組各項(xiàng)因子與模型組相比均無顯著差異；留蘭香油14、140mg·kg-1預(yù)防組小鼠能夠明顯降低肺

7、內(nèi)TGF-β1(P<0.05，P<0.01)和MMP-9含量(P<0.01，P<0.05)。
　　 (6)免疫組化結(jié)果：模型組小鼠肺組織纖維化區(qū)域有大量的α-SMA強(qiáng)陽性表達(dá)，呈棕黃色(P<0.01)。留蘭香油治療組與模型組相比無顯著差異；留蘭香油14、42、140mg·kg-1預(yù)防組α-SMA呈弱陽性表達(dá)，相對模型組均有顯著性差異(P<0.05，P<0.01，P<0.001)。
　　 (7)模型組大鼠肺泡結(jié)構(gòu)紊亂，支氣

8、管周圍及肺泡間隔中有大量的藍(lán)色膠原沉積(P<0.001)。留蘭香油30、100和300mg·kg-1組大鼠與模型組相比膠原沉積明顯減少(P<0.01，P<0.05，P<0.01)。
　　 (8)模型組大鼠肺組織中羥脯氨酸較正常組明顯增高(P<0.001)，留蘭香油30和300mg·kg-1組與模型組相比羥脯氨酸水平明顯降低(P<0.05，P<0.001)。
　　 (9)ELISA結(jié)果：模型組大鼠肺內(nèi)MCP-1和TGF-β

9、1含量較正常組明顯升高(P<0.001)，留蘭香油30和100mg·kg-1組能夠明顯降低大鼠肺內(nèi)MCP-1含量(P<0.001，P<0.01)，留蘭香油30、100和300mg·kg-1組能夠明顯降低肺內(nèi)TGF-β1含量(P<0.01，P<0.05，P<0.001)。
　　 (10)免疫組化結(jié)果：模型組大鼠肺組織細(xì)支氣管及血管平滑肌周圍有大量的α-SMA強(qiáng)陽性表達(dá)(P<0.01)；留蘭香油30和300mg·kg-1組α-SMA

10、表達(dá)較模型組明顯減弱(P<0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 (1)留蘭香油對博萊霉素引起的小鼠肺纖維化初期起干預(yù)作用。留蘭香油預(yù)防組能夠減弱肺纖維化小鼠肺組織病理的膠原沉積、減少肺組織中羥脯氨酸的含量、降低肺組織中MMP-9及TGF-β1的含量、抑制肺組織肌成纖維細(xì)胞α-SMA的表達(dá)，留蘭香油預(yù)防組對肺纖維化初期起到了干預(yù)作用；而留蘭香油治療組對博萊霉素引起的小鼠肺纖維化形成后無治療作用。
　　 (2)留蘭香油對