大黃附子湯對重癥胰腺炎急性肺損傷TLR4-NF-κB信號傳導(dǎo)通路干預(yù)作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：研究TLR4/NF-кB信號傳導(dǎo)通路、蛋白激酶Cα(PKCα)和血清TNF-α、IL-1β、IL-4在重癥胰腺炎急性肺損傷(SP-ALI)中的表達(dá)及大黃附子湯的干預(yù)作用，探討TLR4/NF-кB信號傳導(dǎo)通路在SP-ALI發(fā)病中的意義和大黃附子湯防治作用的靶點(diǎn)。 方法：健康長白豬，體重25～30M，13頭，隨機(jī)分成3組：手術(shù)對照組(對照組，3頭)、重癥胰腺炎急性肺損傷組(模型組，4頭)，大黃附子湯治療組(治療組，6頭)。其中

2、模型組采用主胰管內(nèi)逆行注入4％?；悄懰徕c(1ml/kg)誘導(dǎo)SP-ALI模型，治療組則在模型組基礎(chǔ)上于術(shù)后即刻、術(shù)后12h經(jīng)空腸造瘺管注入大黃附子湯各100ml。各組分別于術(shù)后即刻、術(shù)后6h、術(shù)后12h、術(shù)后24h、術(shù)后48h、術(shù)后72h分取動、靜脈血標(biāo)本動態(tài)檢測血?dú)夥治?，動態(tài)比濁法測定血清內(nèi)毒素(LPS)含量、酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法檢測血清中TNF-α、IL-1β和IL-4動態(tài)變化。術(shù)后72h處死動物，免疫組化檢測肺組織TLR4

3、、PKCα、NF-кB p65表達(dá)，同時觀察肺組織濕/干重比和病理形態(tài)學(xué)變化。 結(jié)果： (1)?；悄懰徕c誘導(dǎo)后6～72h血清淀粉酶、胰腺和肺損傷病理組織學(xué)評分、肺組織濕/干重比、二氧化碳分壓均較對照組明顯升高(P<0.05或P<0.01)，血鈣和動脈血氧分壓有顯著下降(P<0.05或P<0.01)。術(shù)后72h處死動物后可見胰腺表面廣泛淤血、壞死，多處皂化斑；肺體積明顯增大，肺組織重度點(diǎn)、片狀出血及淤血改變，切面有大量暗紅

4、色血性液體流出。證明成功建立了豬SP-ALI模型。 (2)模型組肺組織TLR4、PKCα、NF-кB p65表達(dá)較對照組顯著增加(P<0.01)。 (3)模型組血清內(nèi)毒素、TYF-α、IL-1β濃度術(shù)后6～72h均較對照組明顯升高(P<0.05或P<0.01)。血清IL-4濃度在術(shù)后72h較對照組升高(JF)<0.05)。 (4)治療組肺組織TLR4、PKCα、NF-кB p65陽性表達(dá)較模型組顯著降低(P<0.

5、05或P<0.01)，但仍高于對照組(P<0.05)；治療組血清內(nèi)毒素、TNF-α、IL-1β濃度在術(shù)后各時相點(diǎn)較模型組顯著降低(P<0.05或P<0.01)，但高于對照組(P<0.05或P<0.01)；治療組血清IL-4濃度較對照組和模型組均顯著升高(P<0.05或P<0.01)。 (5)肺組織PKCα與NF-кB p65、TLR4與NF-кBp65、PKCα與TLR4表達(dá)均呈顯著正相關(guān)(r=0.969，P<0.01；r=0.

6、918，P<0.01；r=0.883，P<0.01)。 結(jié)論： (1)主胰管逆行注入4％?；悄懰徕c成功建立SP-ALI模型。 (2)肺組織PKCα、TLR4/NF-кB信號傳導(dǎo)通路及血清TNF-α、IL-1β共同參與了SP-ALI的發(fā)病過程。 (3)大黃附子湯通過降低血清LPS水平，抑制肺組織TLR4、PKC α和NF-кB p65表達(dá)，進(jìn)而下調(diào)血清TNF-α及IL-1β表達(dá)，上調(diào)IL-4表達(dá)，從而減輕S