線粒體單倍型D4b1提高宮頸癌的風(fēng)險(xiǎn)：一個(gè)中國(guó)南方城市的病例對(duì)照研究.pdf

1、溫州醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文論文題目：線粒體單倍型D 4 b l 提高宮頸癌的風(fēng)險(xiǎn)：一個(gè)中國(guó)南方城市的病例對(duì)照研究蔓仨出塾拯! 濕心醫(yī)型太堂隨眉箍三醫(yī)院2苤雪夔塾援( 漁劌匡型太堂附厘箍三醫(yī)院2墓曼! 王塾拯( 漁趔匡型丕堂隨眉箍二匡瞳2溫州醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文線粒體單倍型D 4 b l 提高宮頸癌的風(fēng)險(xiǎn)：一個(gè)中國(guó)南方城市的病例對(duì)照研究摘要目的：本研究旨在評(píng)估線粒體單倍型M 和N 特定多態(tài)性對(duì)中國(guó)南方溫州地區(qū)宮頸癌流行性的作用。方法：在溫州

2、中心醫(yī)院從2 0 1 3 年1 月到1 2 月之間住院的1 5 0 名無(wú)關(guān)聯(lián)的宮頸癌患者( 平均±標(biāo)準(zhǔn)差年齡5 8 ±1 3 ．1 7 歲，年齡范圍3 3 —8 4 歲) ：根據(jù)組織學(xué)病理部門(mén)確認(rèn)診斷為宮頸癌；按照英國(guó)癌癥研究組織規(guī)定的分類標(biāo)準(zhǔn)，宮頸癌的嚴(yán)重程度分級(jí)為I 級(jí)，I I 級(jí)和I I I 級(jí)。同樣選擇在該醫(yī)院體檢的2 1 4 名年齡、性別和地域匹配的正常人作為對(duì)照組( 平均±標(biāo)準(zhǔn)差年齡5 5 ．6

3、 3 ±9 ．4 9 歲，年齡范圍3 0 —8 4 歲) ，排除其他已知的退化性疾病包括癌癥，糖尿病和高血壓。所有納入研究者抽取外周靜脈血2 m l 。從外周血使用S D S - 裂解液提取染色體D N A 。設(shè)計(jì)引物 為L(zhǎng) 9 9 6 7 F ： 5 ’一T C T C C A T C T A T T G A T G A G G G T C T 一3 ’，H l 0 8 5 8 R ： 5 ’一A A T T A G G C

4、 T G T G G G T G G T T G 一3 ’。利用1 7 0 - 9 7 0 3P C R 熱循環(huán)儀器( B i o —R a d ，美國(guó))使用P C R 試劑盒( T a K a R a ，日本) 進(jìn)行P C R 。使用M i n i B E S TD N A 片段提純?cè)噭┖蠽 e r ．3 ．0 ( T a K a R a ，日本) 提純，隨后用A B IP r i s m 3 7 3 0 測(cè)序儀器采用桑格測(cè)序?qū)魏塑?/p>

5、酸多態(tài)性( S N P s ) 進(jìn)行測(cè)序。這些S N P s 是使用C o d o n C o d e 對(duì)準(zhǔn)器3 ．0 ．1 ( C o d o n C o d e 公司，美國(guó)) 參照校對(duì)后的劍橋標(biāo)準(zhǔn)序列( r C R S ) 比較序列獲得。特定的m t D N A 單倍型M 或N 通過(guò)與構(gòu)筑的東亞m t D N A 單倍型樹(shù)上N D 3 和N D 4 L的特征性單核苷酸多態(tài)性對(duì)比確定。結(jié)果：1 ．宮頸癌患者m t D N A 單倍型的

6、分析宮頸癌患者組單倍型M 和N 的頻率，特定在m t ．1 0 3 9 8 和m t ．1 0 4 0 0 ，與年齡，性別，地域都匹配的正常對(duì)照組相比沒(méi)有顯著改變( P ：- O ．3 9 6 ) 。同樣，毗鄰在m t ．1 0 3 9 8 和m t ．1 0 4 0 0 的單倍型R 9 ，F(xiàn) 2 和D 5 a 的發(fā)生頻率在宮頸癌患者組和正常對(duì)照組無(wú)差異。但是，單倍型D 4 b l 在宮頸癌患者組的發(fā)生頻率比正常對(duì)照組高的多( P =