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文檔簡介
1、目的:研究丙泊酚預(yù)處理對大鼠離體心臟常溫及淺低溫缺血再灌注損傷后線粒體細(xì)胞色素C釋放的影響。 方法:應(yīng)用Langendorff離體心臟灌注裝置,建立大鼠離體心臟缺血再灌注損傷模型。實驗分為兩部分。 (1)實驗一為常溫缺血再灌注組,50只SD大鼠隨機(jī)分為5組:對照組(C組),DMSO組(D組),25 μ mol·L-1、50 μ mol·L-1、100 μ mol·L-1丙泊酚組(P1、P2、P3組);5組均在37℃常溫下
2、缺血30min,再灌注60min;D組、P1、P2、P3組在缺血前分別以含20 μ mol·L-1 DMSO、相應(yīng)濃度丙泊酚的K—H液灌注10min,再沖洗5min,重復(fù)2次。 (2)實驗二為淺低溫缺血再灌注組,50只SD大鼠隨機(jī)分為5組:對照組(C組),DMSO組(D組),25、50、100 μ mol·L-1丙泊酚組(P1、P2、P3組);5組均在31℃淺低溫下缺血55min,再灌注60min;D組、P1、P2、P3組在缺血
3、前分別以含20 μ mol·L-1 DMSO、相應(yīng)濃度丙泊酚的K—H液灌注10min,再沖洗5min,重復(fù)2次。 記錄以上兩部分中各組平衡灌注末、缺血前即刻、再灌注30、60min時的心功能指標(biāo);再灌注60min時測定心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)及心肌梗死面積;提取心肌線粒體,觀察電鏡下線粒體的超微結(jié)構(gòu),免疫印跡法測定線粒體與胞漿的細(xì)胞色素C水平。 結(jié)果:(1)實驗一中,與C組相比,P1、P2、P3組再灌注30min、60min時L
4、VEDP降低、LVDP升高(P<0.05);再灌注末心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)降低(P<0.05,P<0.01),心肌梗死面積減少(P<0.05,P<0.01)。P1、P2、P3組與C組相比,電鏡下心肌線粒體形態(tài)明顯改善,表現(xiàn)為線粒體數(shù)量增多,腫脹減輕,外膜較完整,基質(zhì)密度增加等;線粒體細(xì)胞色素C釋放減少,胞漿細(xì)胞色素C的量明顯降低(P<0.05,P<0.01)。分別與P1、P2組比較,P3組線粒體細(xì)胞色素C水平顯著增加(P<0.01與0.05)
5、。D組與C組相比各項指標(biāo)差異無顯著性(P>0.05)。 (2)實驗二中,與C組相比,P3組再灌注30min、60min時LNEDP降低、LVDP升高(P<0.05,P<0.01);P2、P3組再灌注末心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)降低(P<0.05,P<0.01),心肌梗死面積減少(P<0.05)。P1、P2、P3組與C組相比,心肌線粒體形態(tài)改善,P2、P3組線粒體細(xì)胞色素C釋放減少,胞漿細(xì)胞色素C的量明顯降低(P<0.05,P<0.01)。分別與P
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