丙泊酚對大鼠缺血再灌注小腸細胞凋亡及相關基因表達的影響.pdf

1、目的：研究丙泊酚對大鼠缺血再灌注小腸細胞凋亡及相關基因Bcl-2、Bax蛋白表達的影響，探討其可能的機制。 方法：健康SD大鼠24只隨機分為三組，假手術組(S組)、缺血再灌注+生理鹽水組(I/R+NS組)、缺血再灌注+丙泊酚組(I/R+P組)，每組8只。各組均用10﹪水合氯醛(3ml·kg<'-1>)行腹腔注射麻醉，夾閉腸系膜上動脈制備小腸缺血再灌注模型。I/R+NS組和I/R+P組用無創(chuàng)微血管夾夾閉腸系膜上動脈1小時，再灌注2

2、小時。S組和I/R+NS組于術前10分鐘開始分別靜脈泵注生理鹽水10ml·kg<'-1>h<'-1>。(I/R+P)組于夾閉腸系膜上動脈前10分鐘靜脈泵注丙泊酚10 mg·kg<'-1>·h<'-1>。手術和缺血再灌注過程中均面罩給氧(FiO<,2>=33﹪)，術畢斷頭處死動物。每只大鼠取距回盲部10cm空腸組織3cm，生理鹽水沖凈腸內(nèi)容物，10﹪甲醛溶液固定，常規(guī)制備全層石蠟組織切片，分別做病理分析，Bcl-2、Bax蛋白的表達及細胞

3、凋亡的檢測。每組選16個視野分別測量光密度值(OD值)。TUNEL法檢測凋亡的小腸細胞并計算凋亡指數(shù)。 結(jié)果： 1、HE光鏡觀察組織損傷：S組絨毛排列整齊，血管周圍結(jié)構(gòu)正常，無明顯出血，肌層和漿膜層組織結(jié)構(gòu)正常；I/R+NS組組織出現(xiàn)顯著水腫，毛細血管淤血，絨毛上皮細胞脫落，腺體嚴重受損，尤其以絨毛頂端最為嚴重，肌層斷裂，有炎性細胞的浸潤；I/R+P組部分絨毛輕微水腫，頂端上皮輕微受損，壞死為局限性。 2、Bcl

4、-2和Bax蛋白表達的結(jié)果：Bcl-2陽性表達為胞漿染色呈棕黃色，部分亦可在胞核見到陽性染色。Bax蛋白的陽性表達為胞漿染色呈黃褐色。 Bcl-2的OD值在I/R+NS組比S組升高(0.092±0.017比0.057±0.022，P<0.05)而I/R+P組的OD值比I/R+NS組顯著升高(0.242±0.062比0.092±0.017，P<0.01)；Bax蛋白的OD值在I/R+NS組高于S組(0.303±0.087比0.10

5、1±0.035，P<0.01)、I/R+P組的OD值比I/R+NS組低(0.167±0.061比0.303±0.087，P<0.01))但比S組高(0.167±0.061比0.101±0.035，P<0.05)。 3、TUNEL染色：TUNEL標記陽性染色為棕黃色，主要位于細胞核。凋亡檢測結(jié)果表明I/R+NS組細胞凋亡指數(shù)明顯高于S組(0.449±0.019比0.138±0.049，P<0.01)，I/R+P組凋亡指數(shù)明顯低于I