缺血預處理對肝缺血再灌注時細胞凋亡及調控基因表達的影響.pdf

1、目的：在各種肝臟外科手術中，為減少術中出血，常用暫時性的肝門阻斷的方法，而其可能引起嚴重的肝臟再灌注損傷，使肝臟功能受到明顯損害。細胞凋亡是細胞死亡方式之一。國內外研究已證實缺血再灌注（ischemia reperfusionIR）可以引起肝細胞凋亡,而缺血預處理(ischemic preconditioning IP)是預防缺血再灌注損傷的有效手段，但其是否能通過抑制凋亡的方式而起到細胞保護作用，該方面尚待研究。本研究主要通過對兔肝缺

2、血再灌注過程中肝細胞凋亡情況，缺血預處理后肝細胞凋亡以及其調控基因bcl-2/bax 蛋白表達情況進行對比分析，期望從細胞及分子生物水平探討缺血預處理對肝臟缺血再灌注損傷的保護機制。方法：將家兔分為假手術（SO）組、缺血再灌注（IR）組，缺血預處理（IP）組。后2 組中分為4 個亞組（IR3h，12h，24h, 48h，IP3h，12h，24h,48h）。缺血期均為60min。缺血預處理為缺血前采用5min 缺血及5min 再灌注的方法

3、。分別于再灌注3h,12h,24h,48h 后處死動物采取肝臟標本，SO 組于手術后24h 采取肝標本。檢測細胞凋亡及bcl-2/bax 蛋白表達水平。結果：IR 組和IP 組與SO 組比較，細胞凋亡指數(shù)（AI）差異有顯著性增加（P<0.01）；IP 組中IP3h，12h，24h較同時間段IR 組細胞凋亡指數(shù)差異有顯著性降低（P<0.05）；IP48h 與IR48h 相比，凋亡指數(shù)無顯著性差異（P>0.05）。Bcl-2 蛋白表達：IP

4、 組與IR 組及SO 組比較，差異有顯著性增加（P<0.05）；IR 組與SO 組比較，差異無顯著性（P>0.05）。Bax 蛋白表達：IR 組和IP 組與SO 組比較，差異有顯著性增高（P<0.05）；IP 組與IR 組比較，差異無顯著性（P>0.05）。結論：1) 肝缺血再灌注不僅造成肝細胞壞死，還可引起肝細胞凋亡; 2) 在發(fā)生缺血再灌注過程中，作為一種主動性的細胞死亡方式，細胞凋亡現(xiàn)象主要在再灌注早中期大量存在;3）缺血預處理可