雙下肢遠(yuǎn)程缺血預(yù)處理對兔肺缺血再灌注損傷細(xì)胞凋亡的影響.pdf

1、目的:采用兔單肺原位缺血再灌注損傷模型，通過對雙下肢遠(yuǎn)程缺血預(yù)處理后兔單肺原位缺血再灌注損傷引起的肺組織病理學(xué)改變、MDA、SOD、細(xì)胞凋亡指數(shù)(AI)、Bcl-2/Bax及血氣分析的變化，探討雙下肢遠(yuǎn)程缺血預(yù)處理對兔單肺原位缺血再灌注損傷細(xì)胞凋亡的影響及可能機制。
　　 方法:清潔級日本大耳白兔18只，體重2.0-2.5kg，隨機分為3組(n=6)：假手術(shù)對照組(S組)、肺缺血再灌注組(IR組)、肢體遠(yuǎn)程缺血預(yù)處理組(R組)。

2、參照Sekido介紹的方法(略加改造)復(fù)制兔肺缺血再灌注模型：于胸骨旁左側(cè)肋軟骨與肋骨交界處向頭側(cè)剪斷第8-6肋骨，開胸暴露左肺門并留置阻斷帶，在呼氣末阻斷左肺門60min為缺血期，隨后開放阻斷帶恢復(fù)左肺供血和通氣為再灌注期。阻斷左肺門前經(jīng)耳緣靜脈給予低分子肝素1 mg·kg-1抗凝。遠(yuǎn)程缺血預(yù)處理組(R組)在開胸左肺門放置阻斷帶穩(wěn)定30min后用阻斷帶在兔雙下肢根部同時阻斷下肢血流造成雙下肢缺血10min，以多普勒血流探測儀檢測不到股

3、動脈搏動為準(zhǔn)，然后松開阻斷帶再灌10min，重復(fù)三次。30min后結(jié)扎左肺門60min，然后恢復(fù)灌注180min。缺血再灌注組(IR組)在左肺門放置阻斷帶后曠置90min，在呼氣末阻斷左肺門60min制造肺缺血再灌注模型為缺血期，以左肺不張為準(zhǔn)，60min后松開結(jié)扎線，恢復(fù)灌注180min，只在雙下肢松繞阻斷帶但不行雙下肢缺血。假手術(shù)組(S組)只在左肺門放置阻斷帶但不結(jié)扎肺門及只在雙下肢松繞阻斷帶但不行雙下肢缺血。分別在遠(yuǎn)程缺血預(yù)處理前

4、，再灌注15min、30min、60min、120min及180min時采動脈血測血氣并觀察有創(chuàng)動脈血壓的變化。各組分別于再灌注180min放血處死家兔留取標(biāo)本待測肺組織MDA含量、SOD活性、HE染色下觀察肺損傷定量評價指標(biāo)(IQA)的變化以及TUNEL法檢測肺組織凋亡指數(shù)(AI)、Westembloting法半定量Bcl-2、Bax蛋白的表達。實驗過程中監(jiān)測直腸溫度并用電熱毯維持直腸溫度在36-38℃。
　　 結(jié)果:①PaO

5、2，A-aDO2和RI：三組的基礎(chǔ)A-aDO2、PaO2及RI無統(tǒng)計學(xué)差異，隨著再灌注時間的延長，IR組的PO2逐漸降低，尤以再灌注60min內(nèi)明顯。R組和S組的PaO2均高于IR組。IR組的A-aDO2和RI逐漸增加，尤其在再灌注60min時明顯高于R組和S組。再灌注后IR組的A-aDO2和RI明顯高于R組和S組。②IQA：IR組的IQA明顯高于R組和S組。③MDA含量和SOD活性：IR組的MDA含量明顯高于S組和R組，而IR組的SO

6、D活性明顯低于S組和R組。④AI和Bcl-2/Bax：與S組比較，IR組的AI和Bax蛋白含量明顯增加，但Bcl-2明顯降低，并且Bcl-2/Bax降低。與IR組比較，R組的AI和Bax明顯降低，而Bcl-2和Bcl-2/Bax明顯增加。R組和S組之間比較無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 結(jié)論:雙下肢遠(yuǎn)程缺血預(yù)處理對兔肺缺血再灌注損傷具有保護作用，其保護作用主要是通過抑制氧化損傷，上調(diào)Bcl-2/Bax的比值，從而減少肺組織細(xì)胞凋亡的發(fā)生。