膽囊粘膜ABCG1基因表達和膽囊膽固醇息肉發(fā)病關(guān)系的研究.pdf

1、背景：膽囊膽固醇息肉是臨床常見病，可并發(fā)結(jié)石。膽固醇息肉脫落可致急性膽囊炎，甚至是胰腺炎的發(fā)作，某些高危因素下有惡變可能。膽囊膽固醇息肉其病變特征是膽囊壁大量膽固醇酯等脂質(zhì)堆積，通過對膽囊膽固醇息肉病變局部黏膜成分生化分析時發(fā)現(xiàn)，膽固醇酯的含量較對照組增高，可達12倍之多，而游離膽固醇沒有增加。推測膽囊粘膜膽固醇酯病理性增多有三種可能的來源：⑴膽囊粘膜局部合成膽固醇增多和或游離膽固醇酯化增多；⑵膽囊上皮細胞從血液或是膽汁中吸收膽固醇增多

2、；⑶膽囊粘膜膽固醇逆向轉(zhuǎn)運障礙。已有研究表明，膽囊膽固醇息肉患者膽囊粘膜中催化膽固醇酯化的?；o酶A 膽固醇酰基轉(zhuǎn)移酶（ACAT）活性明顯升高，而水解膽固醇酯為游離膽固醇的膽固醇酯水解酶(CEH)活性沒有變化，推測ACAT/CEH 比率升高是膽固醇息肉發(fā)病原因之一；此外膽固醇息肉患者膽汁成分多有膽固醇過飽和，膽汁膽固醇過飽和被認為是膽固醇結(jié)石發(fā)病的病理生理基礎(chǔ)，其在膽固醇息肉發(fā)病中可能也有重要作用，有文獻報道隨著膽汁中膽固醇含量的升高，

3、膽囊上皮細胞吸收膽固醇也相應(yīng)升高，雖然其中大部分被重新分泌至膽囊腔，但殘余膽固醇量可能也高于生理水平，這進一步使得ACAT 活性升高，從而膽固醇酯化增多，膽囊粘膜膽固醇酯堆積。膽囊粘膜吸收的膽固醇存在另一種代謝途徑，就是經(jīng)膽固醇逆向轉(zhuǎn)運途徑，轉(zhuǎn)運至肝臟進行代謝，推測其在膽固醇息肉發(fā)病中存在一定作用。ABCG1 是三磷酸腺苷結(jié)合盒（ATP binding cassette,ABC）G 亞家族一員，主要功能是介導(dǎo)外周組織細胞中膽固醇外流至H

4、DL 并轉(zhuǎn)運至肝臟進行代謝，參與了膽固醇的逆向轉(zhuǎn)運。體外實驗中，乙酰化的LDL 或是LXR 激動劑可以促進巨噬細胞膽固醇外流至HDL，而通過RNA 干擾使ABCG1 去表達，則外流至HDL的膽固醇明顯減少；通過cDNA 轉(zhuǎn)染促使ABCG1 在人胚腎細胞高表達7782，同樣支持ABCG1 可以介導(dǎo)膽固醇外流至HDL；體內(nèi)試驗中，ABCG1 基因敲出小鼠外周組織中可見大量膽固醇及中性脂質(zhì)堆積?？梢夾BCG1 在介導(dǎo)膽固醇外流至HDL 進一步

5、轉(zhuǎn)運至肝臟代謝的過程中發(fā)揮重要作用。但是目前尚無膽固醇息肉患者膽囊粘膜ABCG1 表達的相關(guān)性研究。
　　 目的：通過檢測膽囊粘膜ABCG1 基因及蛋白表達情況，為進一步研究ABCG1 在膽固醇息肉發(fā)病機制中作用提供基礎(chǔ)；通過檢測膽固醇息肉患者膽汁成份、血脂成份，驗證它們在膽固醇息肉發(fā)病中的作用。
　　 方法：本院60 例因膽囊疾患而行膽囊切除術(shù)患者病例中，剔除息肉合并結(jié)石及膽囊粘膜 RNA 電泳示有RNA 降解或是OD

6、 比值提示有蛋白、DNA 污染的病例， 收集整理得到無資料缺失的病例計23 例，其中單純膽囊膽固醇息肉 15例（男 7 例，女8 例，平均年齡46.8±11.54 歲）；對照組8 例（男 5 例，女3例，平均年齡46.25±10.84），其中膽囊腺瘤樣息肉5 例，早期胰腺腫瘤3 例，兩組年齡差異無統(tǒng)計學(xué)意義；分別收集兩組患者空腹靜脈血、膽汁、膽囊壁全層及膽囊粘膜組織，檢測兩組血脂及膽汁成份，PCR 檢測兩組膽囊粘膜ABCG1mRNA相對

7、表達情況，Western blot 檢測膽囊粘膜ABCG1 蛋白表達情況。
　　 結(jié)果：由于膽囊腺瘤樣息肉標本采集困難，本實驗對照組樣本量相對較小，而且其中3 例早期胰腺腫瘤患者標本，雖無膽囊頸部結(jié)石、膽囊積液、膽管結(jié)石及嚴重肝臟、內(nèi)分泌疾病等，但是不能排除原發(fā)疾病是否對膽囊粘膜相關(guān)分子的表達產(chǎn)生影響。假定無上述影響因素情況下，本實驗兩組患者血清膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白等脂質(zhì)成分差異無統(tǒng)計學(xué)意義；兩組患者膽汁

8、成分中，息肉組膽固醇含量及膽固醇飽和指數(shù)與對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)顯著性（p<0.05），可以認為息肉組膽汁膽固醇含量及膽固醇飽和指數(shù)高于對照組，余膽汁成份兩組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義；息肉組膽囊粘膜ABCG1mRNA 表達水平高于對照組(p<0.05)；息肉組膽囊粘膜ABCG1 蛋白表達同樣高于對照組。
　　 結(jié)論：膽囊膽固醇息肉組膽囊粘膜ABCG1 的表達高于對照組，提示ABCG1在膽固醇息肉疾病的發(fā)展中可能有一定作用；同時驗證了