二甲雙胍對(duì)大鼠腎小球系膜細(xì)胞氧化應(yīng)激的影響.pdf

1、目的：觀察高糖條件培養(yǎng)的大鼠腎小球系膜細(xì)胞(Mesangial Cells，MCs)氧化應(yīng)激水平以及二甲雙胍（Metformin，Met）對(duì)其氧化應(yīng)激的影響，探討二甲雙胍保護(hù)腎臟機(jī)制。
　　方法：將大鼠GMCs置于體外培養(yǎng)，分組如下：
　?、僬?duì)照(NG)組：DMEM液（Glu5.6mmol/L）
　　②高糖(HG)組：DMEM液（Glu25mmol/L）
　?、鄱纂p胍1組（Met1組）：HG+Met（0.5

2、mmol/L）
　?、芏纂p胍2組（Met2組）：HG+met（1.0mmol/L）
　　⑤二甲雙胍3組（Met3組）：HG+met（2.0mmol/L）
　　不同濃度二甲雙胍先干預(yù)24h，每組細(xì)胞培養(yǎng)48h后收集細(xì)胞和上清培養(yǎng)液，各個(gè)檢測(cè)指標(biāo)均設(shè)6個(gè)重復(fù)組。MCs內(nèi)還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate，NADPH)氧化酶亞基 p22ph

3、ox和p47phox mRNA表達(dá)采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（Reverse transcription polymerase chain reaction，RT-RCR)方法測(cè)定，上清液中脂質(zhì)過(guò)氧化物丙二醛（MDA）含量及超氧化物歧化酶（SOD）活性采用比色法測(cè)定。
　　結(jié)果：
　?。?）每組MCs上清液中MDA含量的比較
　　與 NC組相比，經(jīng)高糖刺激后的 MCs上清液中MDA含量明顯升高（pt;0.05）；與HG組比

4、較，各二甲雙胍組MCs上清液MDA含量均減少（Pt;0.05）。
　　（2）每組MCs上清液中SOD活性的比較
　　與 NC組相比，經(jīng)高糖刺激后的 MCs上清液中SOD活性明顯下降（pt;0.05）；與HG組比較，各二甲雙胍組上清液 SOD活性均有不同程度升高，但各二甲雙胍組SOD活性仍低于NC組。
　　（3）每組MCs P22phox表達(dá)的比較
　　與NC組相比，經(jīng)高糖刺激后的MCs P22phox表達(dá)顯著增多

5、（pt;0.05）；與HG組比較，各二甲雙胍組上清液P22phox表達(dá)減少，但各二甲雙胍組P22phox表達(dá)高于NC組。
　?。?）每組MCs P47phox表達(dá)的比較
　　與NC組相比，經(jīng)高糖刺激后的MCs P47phox表達(dá)顯著增多（pt;0.05）；與HG組比較，各二甲雙胍組上清液P47phox表達(dá)減少，但各二甲雙胍組P47phox表達(dá)高于NC組。
　　結(jié)論：
　　1.高糖刺激后大鼠MCs上清液中MDA含量