山西太谷釀酒葡萄黑腳病病原菌的分離與鑒定.pdf

1、病害一直是造成作物產(chǎn)量損失的主要原因之一，幾乎所有作物在生長期內(nèi)都會遭到不同程度的危害，造成極大的經(jīng)濟(jì)損失。怎樣有效地防治植物病害，減少損失，是農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的當(dāng)務(wù)之急。其中，對病害病原的分離鑒定，觀察了解病原對寄主的侵染是病害防治的基礎(chǔ)性工作，可以更好地了解病害發(fā)生的規(guī)律、植物感病的機理，對植物病害的防治具有指導(dǎo)作用。 山西太谷及臨近地區(qū)是我國的一個著名的葡萄產(chǎn)區(qū)，生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)葡萄。山西怡園酒莊有限公司葡萄園從2002年開始，首先在美樂

2、(Vitis vinifera cv.Merlot)品種上發(fā)現(xiàn)了生長不良的現(xiàn)象，主要表現(xiàn)為：春季地上部部分或全部新梢生長勢弱，葉小、葉緣水漬狀或出現(xiàn)邊緣干枯，入夏后癥狀有所緩解，但葡萄果實的產(chǎn)量和品質(zhì)都受到明顯影響，并造成植株的進(jìn)一步衰弱，次年病害發(fā)生更為嚴(yán)重。地上部新梢和葉片沒有觀察到病蟲害危害的跡象，對根系的觀察表明，這些植株根系須根少，未觀察到根系害蟲活動，對大根進(jìn)行橫截后可觀察到褐色的壞死組織延伸至木質(zhì)部中央，縱向去除表皮和韌皮

3、部后，可見橢圓形的褐色病斑，病斑發(fā)生的方向和地上部出現(xiàn)癥狀的新梢方向有一致性，病斑發(fā)生的數(shù)量與嚴(yán)重程度也與地上部癥狀的表現(xiàn)程度相一致。因此，認(rèn)為是根系病害的侵染，導(dǎo)致植株地上部出現(xiàn)癥狀。 通過病原菌分離、形態(tài)學(xué)鑒定分析、回接驗證，初步認(rèn)為是柱孢屬(Cylindrocarpon)真菌引起的病害。利用ITs區(qū)域、β-維管蛋白片段區(qū)域(Bt1，Bt2)、線粒體小亞基核糖體(mitochondrialsmall subunit ribo

4、somal，mtSSU rDNA)片段這四個保守區(qū)域?qū)Ψ蛛x到的致病真菌菌株進(jìn)行分子鑒定，同時利用MEGA3.1軟件包構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹。研究結(jié)果表明，本研究分離到的柱孢屬菌株Cylindrocarpon sp．ITS區(qū)域序列片段(545bp)、mtSStJ rDNA片段(629bp)，以及Bt1片段(533bp)與C macrodidymum相應(yīng)區(qū)域有極高的相似性，均達(dá)到99％；而長度為286bp的Bt2片段與C.destructans相似