丹尼斯鳳梨根莖腐爛病病原菌鑒定與藥劑篩選.pdf

1、丹尼斯鳳梨由于花穗美麗，株型多變，深受廣大消費(fèi)者的喜愛。但在高溫高濕的環(huán)境下，植株常發(fā)生莖腐病、根腐病以及心腐病，造成經(jīng)濟(jì)損失達(dá)20％~50％。本研究對采自廣東鶴山市某花卉種植場的丹尼斯鳳梨病株通過病組織分離和對分離菌進(jìn)行致病性測定，獲得引起植株根莖腐爛病的病原菌，再通過形態(tài)比較學(xué)和分子生物學(xué)手段對該病原菌進(jìn)行了種類鑒定，同時(shí)對該病原菌進(jìn)行了室內(nèi)有效藥劑的篩選，并測試了植株對各有效殺菌劑的敏感性。具體結(jié)果如下：
　　1、罹病植株經(jīng)

2、過常規(guī)組織分離法，獲得了54個(gè)真菌菌株和3個(gè)細(xì)菌菌株。其中，根據(jù)真菌的菌落形態(tài)特征和顯微鏡檢觀察結(jié)果，初步歸類為20個(gè)菌株，經(jīng)過單孢分離獲得純培養(yǎng)的35個(gè)單孢菌株。
　　2、采用活體植株和離體葉片接種法，對35個(gè)真菌單孢菌株和3個(gè)細(xì)菌菌株分別進(jìn)行了致病性測定。結(jié)果顯示35個(gè)菌株雖然表現(xiàn)出一定的差異，但都能引致發(fā)病；而細(xì)菌菌株不能發(fā)病，表明不是致病菌。
　　3、對35個(gè)菌株中的代表菌株進(jìn)行了進(jìn)一步的形態(tài)學(xué)觀察，在PDA培養(yǎng)基上

3、，26℃下，菌絲寬度為3.6-9.2μm，孢子囊膨大為指狀或瓣?duì)?，平均大小?28.4×13.3μm；藏卵器球形或近球形，平滑，偶爾串生，直徑平均為27.50-31.25μm；雄器呈棒狀或鉤狀，大小為10.91×5.65μm，4、5個(gè)與藏卵器接觸配合；卵孢子球形、平滑，直徑大小為23-30μm，壁厚約1.81μm。以上形態(tài)特征與群結(jié)腐霉Pythiummyriotylum相符合。
　　4、通過核酸序列測定并與模式菌株及詮釋菌株的序列

4、進(jìn)行分析比對，該35個(gè)菌株在構(gòu)建的系統(tǒng)發(fā)育樹中均能與群結(jié)腐霉聚聚在同一個(gè)分支上，且支持率為98%，表明相似性極高，從分子水平上證明了在形態(tài)上鑒定該病原菌為群結(jié)腐霉 Pythium myriotylum Drechsler的正確性。
　　5、根據(jù)病原菌確定為群結(jié)腐霉，選擇目前市面上較為常見的12種殺菌劑對該病原菌進(jìn)行了有效藥劑的篩選。結(jié)果表明，25％吡唑醚菌酯乳油、30％噁霉靈水劑、30％苯甲·丙環(huán)唑乳油、72％霜脲·錳鋅可濕性粉劑

5、和58％甲霜·錳鋅可濕性粉劑等5種殺菌劑的抑菌效果好且具有很高的可靠性，EC50值分別為50.73078、10.95828、28.27244、10.7134和14.54234；相關(guān)系數(shù)為0.788、0.989、0.997、0.877和0.977；毒力回歸方程斜率分別為1.54711、0.72033、1.73296、2.59574和1.02112，表明群結(jié)腐霉對以上殺菌劑具有較好的敏感性，表明該5種殺菌劑為有效殺菌劑。
　　6、為了