青魚腸道出血病病原菌的分離鑒定與疫苗的初步研究.pdf

1、嗜水氣單胞菌感染引起的水生動(dòng)物細(xì)菌性出血病,是危害水生動(dòng)物種類最多、影響區(qū)域最廣、流行季節(jié)最長(zhǎng)、發(fā)病率和死亡率高、造成經(jīng)濟(jì)損失最嚴(yán)重的一種傳染性疾病。
　　 2009年7月,湖北省荊州市某青魚養(yǎng)殖示范區(qū)域暴發(fā)嚴(yán)重的腸道出血病。筆者從患典型腸道出血病的青魚肝臟中分離到優(yōu)勢(shì)菌1株BCB01,人工腹腔注射感染試驗(yàn)可復(fù)制出與自然發(fā)病相似的癥狀。單克隆菌落的Biolog系統(tǒng)鑒定結(jié)果表明,菌株BCB01為嗜水氣單胞菌。細(xì)菌16S rRNA基

2、因測(cè)序與系統(tǒng)進(jìn)化樹分析結(jié)果表明,菌株BCB01與嗜水氣單胞菌(EF645799)的親緣關(guān)系最近,其相似性為99％。藥物敏感性試驗(yàn)結(jié)果顯示,該菌株對(duì)大多數(shù)試驗(yàn)藥物敏感,其中對(duì)復(fù)達(dá)欣、頭孢西丁、先鋒必等11種藥物的高度敏感。
　　 將福爾馬林滅活的嗜水氣單胞菌(F-AH)、菌體外膜蛋白(OMP)和菌體脂多糖(LPS)作為免疫原,分別免疫健康青魚。在免疫1、2、4、7、14、21、28d后分別從每組中隨機(jī)各取5尾試驗(yàn)魚,尾靜脈采血,進(jìn)

3、行外周血的血細(xì)胞計(jì)數(shù)和白細(xì)胞分類計(jì)數(shù),測(cè)定細(xì)胞吞噬活性和抗體效價(jià)。結(jié)果表明:3種免疫原均可誘導(dǎo)紅細(xì)胞和白細(xì)胞數(shù)量增加,并引起各種白細(xì)胞分類百分比變化,提高吞噬活性和抗體效價(jià)；免疫應(yīng)答早期(第1周)主要是紅細(xì)胞、單核細(xì)胞和中性粒細(xì)胞數(shù)量明顯增加,吞噬細(xì)胞的吞噬活性迅速提高,吞噬百分比(PP)和吞噬指數(shù)(PI)第4天達(dá)峰值:F-AH組、OMP組和LPS組的PP、PI值依次分別為39.84％、46.53％、41.59％;3.94、4.26、3