原因不明復發(fā)性流產(chǎn)患者蛻膜和絨毛組織中STAT4、STAT6表達及意義.pdf

1、復發(fā)性流產(chǎn)(recurrent spontaneous abortion,RSA)是指與同一性伴侶連續(xù)發(fā)生3次或3次以上自然流產(chǎn),RSA病因復雜,現(xiàn)已明確的因素有:遺傳基因缺陷、母體生殖結(jié)構(gòu)畸形、感染、內(nèi)分泌異常、環(huán)境理化與機械因素,免疫因素方面已明確的病因有父母血型不合、父母雙方抗精子抗體的存在、母體抗父方淋巴細胞的細胞毒抗體不足、母體抗子宮內(nèi)膜抗體以及孕婦抗磷脂抗體產(chǎn)生過多等。除此之外,約50％RSA患者不存在上述病因,稱為原因不明

2、復發(fā)性流產(chǎn)(URSA)。信號轉(zhuǎn)導和轉(zhuǎn)錄激活因子(signal transducersand activators of transcription,STATs)是一類隱藏在胞漿中,能被眾多的細胞外多肽類分子激活,參與基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控的蛋白質(zhì)家族。STAT6是該家族成員之一,它通過JAK-STAT信號轉(zhuǎn)導途徑介導細胞因子IL-4、IL-13等的基因表達,發(fā)揮多種生物學功能。當IL-4同膜受體(IL-4Rα)發(fā)生作用,引起酪氨酸系統(tǒng)(JAKs)

3、的激活,進而激活胞漿內(nèi)STAT6,引起該蛋白Y641位點上的酪氨酸殘基磷酸化,激活的SH2區(qū)域發(fā)生同源或異源二聚化而形成二聚體;二聚體進入細胞核內(nèi)與特定的DNA位點結(jié)合,引起IL-4相關(guān)基因的表達。STAT6激活后的多種生物學功能包括調(diào)節(jié)TH2優(yōu)勢應答等在RSA的發(fā)病中起重要作用。STAT4基因位于染色體2q32.2-q32.3,它是調(diào)節(jié)IL-12和T細胞分化的必不可少的因素,以往的研究表明IL-12介導STAT家族的激活,激活后的ST

4、AT4通過IL-12的信號通路調(diào)節(jié)Th1的細胞分化,如果STAT4表達下降,會明顯抑制IL-12介導的Th1反應。敲除IL-12或STAT4導致TH1細胞反應顯著降低,IFN-γ主要誘導Th1應答,抑制IL-4介導的Th2反應,在RSA的發(fā)病中同樣起著重要的作用。STAT4、STAT6與Th1、Th1的平衡關(guān)系密切,STAT4可激活誘導Th1的極化及一系列的基因,實驗發(fā)現(xiàn)野生型和STAT4缺陷小鼠表現(xiàn)Th2免疫應答優(yōu)勢,STAT6缺陷小

5、鼠表現(xiàn)Th1免疫優(yōu)勢,因此STAT4途徑是細胞因子調(diào)節(jié)免疫細胞向Th1分化的最主要的信號傳導通路,而STAT6途徑是細胞因子調(diào)節(jié)免疫細胞向Th2分化的最主要的信號傳導通路。我們采用免疫組織化學方法研究RSA患者蛻膜和絨毛組織STAT4、STAT6的表達強度提供了方法學依據(jù)。STAT4和STAT6與Th1,Th2的關(guān)系研究較多,其在RSA患者蛻膜和絨毛組織中表達是否也存在這種關(guān)系?STAT4和STAT6的表達變化是否與RSA有關(guān)?二者是否

6、存在相關(guān)性?國內(nèi)尚未見報道。目的1.研究RSA患者蛻膜和絨毛組織中STAT4和STAT6表達情況。探討蛻膜和絨毛組織STAT4和STAT6與Th1,Th2的關(guān)系,以及在RSA患者蛻膜、絨毛中的相關(guān)性。2.將STAT4和STAT6從信號轉(zhuǎn)導通路方面導入RSA的發(fā)病機制研究領域。材料和方法1.研究對象及分組①RSA組選擇2007年11月至2008年5月就診于鄭州大學第三附屬醫(yī)院婦科門診妊娠12周以內(nèi)行清宮術(shù)的URSA患者20例,年齡26—3

7、5歲,平均29歲,自然流產(chǎn)次數(shù)≥3(包括本次),現(xiàn)已妊娠,本次B超提示胚胎停止發(fā)育。排除染色體、解剖、內(nèi)分泌及感染、自身免疫性疾病。②對照組:選擇同期就診于我院婦科門診、妊娠12周以內(nèi)要求人工流產(chǎn)的正常早期妊娠婦女20例,年齡24~35歲,平均28歲;既往無自然流產(chǎn)、死胎、死產(chǎn)史、無染色體、解剖、內(nèi)分泌方面的異常及感染、自身免疫性疾病史,均有1胎以上正常分娩史,本次妊娠無陰道流血、腹痛等先兆流產(chǎn)癥狀和體征;B超檢查證實胚胎發(fā)育正常。2.

8、方法收集兩組孕婦新鮮蛻膜和絨毛組織,經(jīng)10%中性甲醛固定,石蠟包埋。采用免疫組化進行定性及半定量測定蛻膜和絨毛組織中STAT4和STAT6的表達情況。3.統(tǒng)計學分析所有數(shù)據(jù)均運用SPSS10.0軟件進行統(tǒng)計學分析。α=0.05作為檢驗水準。結(jié)果1.研究對象一般情況比較:RSA組和對照組相比,年齡和孕周差異無統(tǒng)計學意義(p>0.01).2.STAT4在兩組絨毛組織中的表達:STAT4在兩組絨毛組織均呈陽性表達,主要表達在絨毛滋養(yǎng)細胞的胞漿

9、。RSA組表達水平高于對照組。(p<0.01)3.STAT4在兩組蛻膜組織中的表達:主要表達在蛻膜組織中間質(zhì)細胞胞漿。STAT4在兩組蛻膜組織中的表達水平均低于同組絨毛組織(p<0.01)。4.STAT6在兩組絨毛組織中的表達:STAT6主要表達在絨毛滋養(yǎng)細胞的胞漿。RSA組低于對照組表達水平。(p<0.01)5.RSA組母胎界面上STAT4和STAT6的表達水平呈負相關(guān)。(r=-0.789,P<0.01)結(jié)論1.RSA組絨毛和蛻膜組織