抑制性殺傷性免疫球蛋白樣受體在不明原因早期復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)蛻膜中的表達(dá).pdf

1、目的：復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)(RSA)病因復(fù)雜，除遺傳、內(nèi)分泌、解剖、感染、自身免疫因素異常外，還有近1/2患者原因不明，原因不明的RSA的發(fā)生可能與母胎間同種免疫異常有關(guān)，其免疫發(fā)病機(jī)理尚不清楚。近年來，母胎界面上的自然殺傷細(xì)胞(NK細(xì)胞)的作用受到人們關(guān)注， NK細(xì)胞的功能主要通過其表面受體與靶細(xì)胞表面配體結(jié)合來調(diào)節(jié)，殺傷細(xì)胞免疫球蛋白樣受體(killer cell immunoglobulin-like receptors，KIR)主要存

2、在于NK細(xì)胞和部分T細(xì)胞表面，包括抑制性和活化性受體，通過與胎兒滋養(yǎng)細(xì)胞上表達(dá)的HLA-Ⅰ類分子結(jié)合，傳遞抑制性或活化性信號(hào)，來調(diào)控NK細(xì)胞的殺傷活性。抑制性KIR質(zhì)(多態(tài)性)、量(表達(dá)水平)的變化都可以影響到抑制性信號(hào)的傳遞，從而使NK細(xì)胞的殺傷活性增加，可能會(huì)造成病理妊娠。本研究的目的是通過研究抑制性KIR在mRNA水平和蛋白水平的表達(dá)變化與不明原因復(fù)發(fā)性早期自然流產(chǎn)是否存在關(guān)聯(lián)，探討免疫遺傳因素在RSA發(fā)病中的作用。 方法

3、：篩選2007年2月-2007年11月我院生殖中心就診的30例不明原因的復(fù)發(fā)性早期自然流產(chǎn)患者作為研究組，隨機(jī)選取我院計(jì)劃生育門診就診的同期正常早孕要求行人工流產(chǎn)術(shù)者30例作為對(duì)照組，在無菌條件下采集人工流產(chǎn)術(shù)后蛻膜組織，采用反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(reverse transcription,RT-PCR)技術(shù)，即從mRNA水平上對(duì)每例入選者進(jìn)行6種抑制性KIR(KIR2DL1-4,KIR3DL1，KIR3DL2)檢測(cè)，比較其表達(dá)率和表達(dá)量

4、在研究組和對(duì)照組之間的差異；采用蛋白質(zhì)免疫印跡(Western blotting)從蛋白水平上檢測(cè)KIR2DL1，KIR2DL3的表達(dá)率和表達(dá)量在研究組和對(duì)照組之間的差異。 結(jié)果：1.研究組蛻膜6種抑制性KIRmRNA陽性表達(dá)率分別為KIR2DL180.00％，KIR2DL2 43.33％，KIR2DL3 63.33％， KIR2DL4 76.67％，KIR3DL1 46.67％，KIR3DL2 60.00％，與對(duì)照組(KIR2

5、DL1 83.33％，KIR2DL2 70.00％，KIR2DL3 73.33％， KIR2DI4 70.00％， KIR3DL1 63.33％，KIR3DL2 66.67％)相比，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。2.在被檢測(cè)的6種抑制性KIR中，研究組蛻膜同時(shí)表達(dá)3種及3種以上抑制性KIR的人數(shù)比例為30％，較對(duì)照組(60％)顯著降低(P=0.02<0.05)。3.研究組蛻膜抑制性KIR2DL4mRNA的表達(dá)量為0.54±0.10

6、，顯著低于對(duì)照組(1.54±0.20)，P=0.026<0.05，其它抑制性KIRmRNA未發(fā)現(xiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。4.研究組蛻膜中KIR2DL1蛋白陽性表達(dá)率為76.67％(23/30)，對(duì)照組為83.33％(25/30)，兩組比較差異無顯著性(P：0.5 19>0.05)；研究組蛻膜中KIR2DL3蛋白陽性表達(dá)率為60.00％(18/30)，均較對(duì)照組66.67％(20/30)略低，但差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.592>0.05)。5.研究