三種膀胱灌注對(duì)膀胱樹(shù)突狀細(xì)胞及尿IL-2的影響及意義.pdf

1、背景和目的： 膀胱腫瘤是泌尿外科最常見(jiàn)的惡性腫瘤，其臨床特點(diǎn)主要是高發(fā)病率、高復(fù)發(fā)率和低度惡性。膀胱灌注治療膀胱腫瘤是預(yù)防膀胱腫瘤復(fù)發(fā)的有效的方法，傳統(tǒng)的膀胱灌注的藥物有BCG(BacillusCamette-Guerin)、絲裂霉素(MitomycinC)、塞替派(Thiotepa)、阿霉素(Doxorubicin)等。目前，在這幾個(gè)傳統(tǒng)的灌注藥物當(dāng)中，效果比較可靠的、應(yīng)用最廣的要屬BCG。隨著醫(yī)療科技的發(fā)展，大量的新的灌注方

2、法不斷出現(xiàn)，例如吡柔比星、吡柔比星聯(lián)合BCG、IL-2聯(lián)合BCG、吡柔比星聯(lián)合絲裂霉素、表阿霉素、羥基喜樹(shù)堿、全反式維甲酸、BCG細(xì)胞壁骨架聯(lián)合IL-2、α-干擾素等，但這些新的灌注方法的療效大多來(lái)自臨床觀察，尚未得到一致的肯定，在這些新的灌注方法中，眾多文獻(xiàn)提到了IL-2聯(lián)合BCG膀胱灌注的療效優(yōu)于單純BCG灌注療效，但在聯(lián)合灌注是如何提高療效，如何預(yù)防膀胱腫瘤復(fù)發(fā)機(jī)理的研究卻很少(未發(fā)現(xiàn)國(guó)內(nèi)相關(guān)報(bào)道)。本研究的目的就是通過(guò)對(duì)比分析I

3、L-2聯(lián)合BCG、BCG、絲裂霉素三種膀胱灌注方法對(duì)wistar大白鼠膀胱組織中樹(shù)突狀細(xì)胞(dendriticcell，DC)和尿IL-2的影響，探討聯(lián)合灌注預(yù)防膀胱腫瘤復(fù)發(fā)的免疫機(jī)制，為聯(lián)合灌注治療優(yōu)于單純BCG灌注治療提供理論支持，同時(shí)也為探索尋找判斷膀胱灌注藥物療效的一些理論指標(biāo)提供新的思路。 樹(shù)突狀細(xì)胞(dendriticcell，DC)是由美國(guó)學(xué)者Steinman于1973年發(fā)現(xiàn)的，DC是目前所知的機(jī)體內(nèi)功能最為強(qiáng)大的

4、抗原呈遞細(xì)胞，因其成熟時(shí)伸出許多樹(shù)突樣或偽足樣突起而得名。有別于其他抗原呈遞細(xì)胞，DC最大的特點(diǎn)是能夠顯著刺激初始T細(xì)胞進(jìn)行增殖，并為淋巴細(xì)胞提供重要的粘附和共同刺激分子。成熟的樹(shù)突狀細(xì)胞能夠是有效的抗原捕獲細(xì)胞。炎性因子、Toll樣受體(例如細(xì)菌的部分成分、BCG)、CD40L、TFN-α等可以影響DC分化成熟。成熟的DC能夠激活和維持CTL、使MHC表達(dá)增高、促進(jìn)共同刺激分子如CD83、CD86、CD54、CD40的產(chǎn)生，從而分泌大

5、量的IL-2。因此DC是機(jī)體免疫應(yīng)答的初始者，在免疫應(yīng)答的誘導(dǎo)中具有獨(dú)特的地位。 國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)DC與膀胱腫瘤的關(guān)系也做了大量研究，膀胱組織中DC的數(shù)量能很好的反映腫瘤的分級(jí)、分期、復(fù)發(fā)以及預(yù)后。 IL-2抗腫瘤作用已經(jīng)有了很多的研究，首先，IL-2可以刺激T淋巴細(xì)胞增殖、分化、成熟，同時(shí)IL-2可誘導(dǎo)T細(xì)胞表面IL-2R的表達(dá)增加，還可刺激其它細(xì)胞因子如TNF、IFN-γ的分泌。除了T細(xì)胞，IL-2也對(duì)B細(xì)胞、NK細(xì)胞、

6、巨噬細(xì)胞有誘導(dǎo)、激活的作用，功能具有上調(diào)作用，使機(jī)體免疫功能增強(qiáng)。 材料和方法： 將44只雌性wistar大白鼠隨機(jī)分為生理鹽水對(duì)照組以及BCG組、絲裂霉素組、IL-2聯(lián)合BCG組，分別定期進(jìn)行9次膀胱灌注并分批處死取出膀胱組織并收集膀胱內(nèi)尿液，用免疫組化的方法檢測(cè)膀胱組織中：DC的數(shù)量，用雙抗體夾心酶免疫吸附法(ELISA法)測(cè)定尿IL-2含量，觀察膀胱組織DC及尿IL-2的變化。 結(jié)果： 1.DC平均

7、數(shù)量：對(duì)照組為4.8±3.4CDS/HPF、IL-2聯(lián)合BCG組為28.4±8.0CDS/HPF、BCG組為16.6±5.9CDS/HPF、絲裂霉素組為4±2.3CDS/HPF。 2.尿IL-2濃度：對(duì)照組為35.7±11.3ng/L、IL-2聯(lián)合BCG組為87.5±30.4ng/L、BCG組為58.7±20ng/L、絲裂霉素組為35.9±9.6ng/L。 3.IL-2聯(lián)合BCG不僅增加了局部免疫功能，而且提高了全身免疫