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文檔簡介
1、目的:
探討類固醇生成因子-1(Steroidogenic factor-1 SF-1)在早孕期小鼠子宮內(nèi)膜的表達(dá)規(guī)律及SF-1的表達(dá)對子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞增殖的影響及其調(diào)控機(jī)制。
方法:
通過成功構(gòu)建小鼠正常妊娠，假孕，人工誘導(dǎo)蛻膜化的模型并收集材料，應(yīng)用這些材料進(jìn)行免疫組織化學(xué)，Western Blot方法檢測小鼠在第1,4,5,6,8天及誘導(dǎo)蛻膜化組和對照組子宮內(nèi)膜的SF-1的表達(dá)情況。然后分離原代小鼠子
2、宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞并進(jìn)行了鑒定；利用Lipofectamine2000轉(zhuǎn)染pCMV6-SF-1的表達(dá)質(zhì)粒、PI3K信號(hào)通路抑制劑LY294002和mTOR信號(hào)通路抑制劑Rapamycin等不同方式處理小鼠原代基質(zhì)細(xì)胞。
結(jié)果:
在正常妊娠小鼠子宮內(nèi)膜中，免疫組織化學(xué)和Western Blot結(jié)果顯示SF-1在第5,6,8天著床點(diǎn)表達(dá)高于著床旁；在假孕小鼠子宮內(nèi)膜中，SF-1在PD1-PD8的表達(dá)沒有明顯差異；在人工誘導(dǎo)蛻
3、膜化中，小鼠子宮內(nèi)膜SF-1的表達(dá)在蛻膜化組里明顯高于對照組。通過Western Blot檢測結(jié)果顯示過表達(dá)SF-1后可顯著誘導(dǎo)增殖相關(guān)基因 PCNA及PH3的蛋白表達(dá)及細(xì)胞增殖；EdU結(jié)果也顯示過表達(dá)SF-1后可顯著誘導(dǎo)增殖；同時(shí)Western Blot檢測PI3K-AKT-mTOR信號(hào)通路相關(guān)蛋白的表達(dá)，結(jié)果表明PI3K-AKT-mTOR信號(hào)通路參與了SF-1過表達(dá)后引起的細(xì)胞增殖。
結(jié)論:
1.SF-1可以誘導(dǎo)
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