肝X受體-α在大鼠高脂飲食所致脂肪性肝病發(fā)病機(jī)制中的作用.pdf

1、目的:
　　通過建立大鼠高脂飲食所致脂肪性肝病模型，探討轉(zhuǎn)錄因子肝X受體-α(LXR-α)在非酒精性脂肪性肝病發(fā)病機(jī)制中的作用。
　　方法:
　　45只成年雄性Wistar大鼠隨機(jī)等分為對(duì)照組、模型組和激動(dòng)劑組。對(duì)照組給予普通飼料喂養(yǎng)，而模型組和激動(dòng)劑組給予高脂飼料喂養(yǎng)，激動(dòng)劑組另給予30 mg/kg LXR激動(dòng)劑T0901317腹腔注射。實(shí)驗(yàn)前及實(shí)驗(yàn)后4周、8周檢測血脂水平。實(shí)驗(yàn)后8周處死大鼠，取肝臟行常規(guī)HE染色觀

2、察脂質(zhì)沉積程度，實(shí)時(shí)定量RT-PCR檢測肝臟內(nèi)LXR-α、ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1(ABCA1)和固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1c(SREBP-1c) mRNA表達(dá)，Westem blot檢測LXR-α蛋白表達(dá)，凝膠遷移電泳實(shí)驗(yàn)(EMSA)檢查LXR的DNA結(jié)合能力。
　　結(jié)果:
　　1.血脂檢測:與對(duì)照組相比，模型組血清膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白顯著增高，而高密度脂蛋白顯著降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);與模型組相比，

3、激動(dòng)劑組血清膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白顯著降低，高密度脂蛋白顯著增高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　2.肝臟病理檢查:與對(duì)照組相比，模型組與激動(dòng)劑組均顯示不同程度的脂肪變性，且以激動(dòng)劑組改變較為顯著。
　　3.RT-PCR檢測:模型組大鼠肝臟LXR-α、ABCA1及SREBP-1c mRNA表達(dá)水平與對(duì)照組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，而激動(dòng)劑組LXR-α、ABCA1及SREBP-1c mRNA水平明顯高

4、于模型組(P＜0.05)。
　　4.Western blot檢測:各組大鼠肝臟中均有LXR-α蛋白表達(dá)。模型組與對(duì)照組LXR-α蛋白表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，但激動(dòng)劑組LXR-α表達(dá)明顯高于模型組（P＜0.05）。
　　5.EMSA檢測:模型組大鼠肝臟中LXR-α的DNA結(jié)合能力與對(duì)照組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，而激動(dòng)劑組大鼠肝臟中LXR-α的DNA結(jié)合能力明顯高于模型組(P＜0.05)。