急性排斥反應(yīng)時移植腎組織內(nèi)HLA-Ⅱ的表達(dá)研究.pdf

1、目的：隨著外科腎移植手術(shù)技術(shù)的發(fā)展和各種新型免疫抑制藥物的開發(fā)應(yīng)用，臨床腎移植已經(jīng)逐漸被人們接受，并得以廣泛開展，成為治療終末期腎病的有效方法。但同種異體移植術(shù)后發(fā)生的排斥反應(yīng)，特別是急性排斥反應(yīng)是制約當(dāng)前臨床。腎移植，乃至整個器官移植發(fā)展的主要因素之一。隨著人類在分子生物學(xué)領(lǐng)域研究的進(jìn)展以及在基因技術(shù)方面的進(jìn)一步突破，人們認(rèn)識到MHC基因表達(dá)與免疫排斥反應(yīng)的關(guān)系密切，特別是對能引起急性排斥反應(yīng)的MIIC-II類分子的研究成為近20年來

2、的熱點(diǎn)。在誘發(fā)免疫排斥反應(yīng)的幾個環(huán)節(jié)中，T細(xì)胞活化是啟動同種排斥反應(yīng)的始動環(huán)節(jié)，T細(xì)胞表面的T細(xì)胞受體(T cell receptor，TCR)與移植物表面供體特異性主要組織相容性復(fù)合體(major histocomptibilitycompletment，MHC)分子及其提呈抗原之間相互作用所表達(dá)的第一信號和共刺激通路激活后所表達(dá)的第二信號的雙重參與是T細(xì)胞活化并最終導(dǎo)致特異性免疫反應(yīng)的必要條件。MHC分子表達(dá)于所有人類細(xì)胞表面，在特

3、定的條件下能引起強(qiáng)而迅速的排斥反應(yīng)，通常稱為人類白細(xì)胞抗原(Human．leukocvte antigen，HLA)。本研究擬探討MHC-Ⅱ類分子在臨床腎移植中的表達(dá)規(guī)律，了解其與急性排斥反應(yīng)的關(guān)系。 方法：本研究為一項(xiàng)對照試驗(yàn)，自2004年9月至2005年12月期間，對于在中南大學(xué)湘雅醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院衛(wèi)生部器官移植研究院進(jìn)行腎移植的53例患者，根據(jù)自愿原則行移植腎活檢。其中男性45例，女性8例。年齡13-62歲，平均43±5

4、歲。術(shù)后常規(guī)免疫抑制方案為環(huán)孢素A、曉悉和強(qiáng)的松，所有病人均隨訪滿6個月以上。腎活檢組織用10％中性福爾馬林液固定，常規(guī)石蠟包埋，連續(xù)切片。用免疫組化技術(shù)檢測腎組織內(nèi)HLA-Ⅱ的表達(dá)。活檢時間：術(shù)中(供腎修整結(jié)束時)、術(shù)后7天、1月、6月、1年或1年以上，當(dāng)患者出現(xiàn)腎功能異常隨時進(jìn)行移植腎活檢。 結(jié)果：①腎活檢結(jié)果：53例腎移植受體共行腎活檢198次。其中供腎修整結(jié)束時取活檢53例次；術(shù)后。腎功能正常時(穩(wěn)定期)定期穿刺活檢81

5、例次；腎功能異常時腎活檢64例次，包括急性排斥反應(yīng)(acute rejection，AR)28例次，抗AR治療后9例次，非急性排斥反應(yīng)(N-AR)27例次(輸尿管并發(fā)癥6例、慢性排斥反應(yīng)14例、藥物性。腎損傷7例次)。②HLA-Ⅱ抗原表達(dá)：HLA-Ⅱ在所有活檢的腎組織上皮細(xì)胞上表達(dá)陽性，與移植前比較，腎功能穩(wěn)定期的標(biāo)本中，術(shù)后7天腎小管上皮細(xì)胞陽性率顯著增加，其后逐漸下降，半年后轉(zhuǎn)陰性；與移植前比較，AR時HLA-Ⅱ抗原在腎小管上皮細(xì)胞

6、、血管內(nèi)皮細(xì)胞、上皮細(xì)胞和炎性細(xì)胞上的表達(dá)均顯著增加，其中炎性細(xì)胞全部呈陽性表達(dá)，系膜細(xì)胞陽性率為25％，腎小管上皮細(xì)胞陽性率為75％，血管內(nèi)皮細(xì)胞陽性率為82％；抗排斥治療7天后HLA-Ⅱ抗原的表達(dá)下降至術(shù)前水平，其中系膜細(xì)胞無一例陽性，腎小管上皮細(xì)胞陽性率下降為11％，血管內(nèi)皮細(xì)胞陽性率為22％；移植后N-AR組系膜細(xì)胞染色陽性僅為3.7％，腎小管上皮陽性率為14.8％，血管內(nèi)皮細(xì)胞陽性率為44％，所以AR組在腎小管上皮細(xì)胞、血管內(nèi)

7、皮細(xì)胞和上皮細(xì)胞上HLA-Ⅱ的表達(dá)也具有顯著差異(p<0.05)。 結(jié)論：①移植腎組織內(nèi)HLA-Ⅱ類分子表達(dá)與排斥反應(yīng)密切相關(guān)，提示該分子在腎移植排斥反應(yīng)的病理損害過程中起重要作用。②AR時移植腎組織內(nèi)大量淋巴細(xì)胞浸潤，并且炎性細(xì)胞以及排斥反應(yīng)的靶細(xì)胞如腎小管上皮細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞上HLA-Ⅱ類分子強(qiáng)表達(dá)。③HLA-Ⅱ類分子表達(dá)是動態(tài)變化的。移植物表面HLA-Ⅱ類分子的表達(dá)變化可影響其免疫原性的反應(yīng)原性。④用免疫組織化學(xué)技術(shù)測定