鏈脲佐菌素致胰島破壞及其與高血糖關(guān)系的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的： 在用鏈脲佐菌素（Streptozotocin，STZ）建立糖尿病動(dòng)物模型的研究中，有關(guān)小劑量的STZ一次性注射后血糖、糖耐量等的變化報(bào)道不一，且缺乏長(zhǎng)期追蹤報(bào)道的數(shù)據(jù)。大劑量STZ一次性注射后，對(duì)成模（高血糖）動(dòng)物胰腺胰島的形態(tài)學(xué)觀察研究多，形態(tài)定量研究少，對(duì)胰島（總體積）究竟破壞到何種程度，與血糖水平的關(guān)系以及胰島破壞后能否恢復(fù)等問(wèn)題仍不清楚。對(duì)未成模動(dòng)物很少有人研究，未成模動(dòng)物胰腺胰島的破壞程度如何，糖耐量有無(wú)異常，

2、以后血糖是否會(huì)升高，是否可用于建立Ⅱ型糖尿病模型等，都還缺乏研究。本實(shí)驗(yàn)采用體視學(xué)形態(tài)定量研究方法，研究STZ對(duì)大鼠胰腺胰島的破壞情況，并結(jié)合胰島素、血糖測(cè)量以及腹腔葡萄糖耐量試驗(yàn)，探討胰島破壞與高血糖之間的關(guān)系，從而為STZ致大鼠糖尿病模型研究提供更多的理論基礎(chǔ)。方法： 1.實(shí)驗(yàn)1：普通級(jí)雄性SD大鼠（10～12w齡）98只，隨機(jī)分為對(duì)照組25只，小劑量組44只，大劑量組29只；實(shí)驗(yàn)2：普通級(jí)雄性SD大鼠（12～14w齡）46

3、只，隨機(jī)分為對(duì)照組10只，大劑量組36只。小劑量組按30 mg/kg的劑量一次性腹腔內(nèi)注射STZ，大劑量組按60 mg/kg的劑量一次性腹腔內(nèi)注射STZ，對(duì)照組均一次性腹腔內(nèi)注射等量的配制STZ溶液用的緩沖液。 2.在注射STZ或緩沖液后的第7d、14d、28d、42d、56d和84d，檢測(cè)動(dòng)物體重、空腹血糖并進(jìn)行腹腔葡萄糖耐量試驗(yàn)（IPGTT）。在注射STZ或緩沖液后的第7d（實(shí)驗(yàn)1）和84d（實(shí)驗(yàn)2），同時(shí)檢測(cè)大劑量組和對(duì)照

4、組的血清胰島素，然后處死動(dòng)物，取胰腺標(biāo)本，制作羥乙基甲基丙烯酸樹(shù)脂包埋的胰腺切片，光鏡下定性觀察胰腺內(nèi)胰島的結(jié)構(gòu)，用體視學(xué)方法測(cè)量胰腺內(nèi)胰島的大小及總體積等。 結(jié)果： 1.小劑量STZ（實(shí)驗(yàn)1）注射后，所有動(dòng)物在各時(shí)間點(diǎn)均未導(dǎo)致高血糖，且IPGTT無(wú)異常。 2.大劑量STZ（實(shí)驗(yàn)2）注射后第7d，有29只動(dòng)物成活，其中19只動(dòng)物導(dǎo)致高血糖（血糖≥10mmol/L），另10只動(dòng)物未致高血糖；至第84d，致與未致高血

5、糖動(dòng)物各有9只成活。成活的高血糖動(dòng)物在各時(shí)間點(diǎn)一直處于高血糖水平，未見(jiàn)轉(zhuǎn)復(fù)；成活的未致高血糖動(dòng)物中，有6只的血糖一直處于對(duì)照組水平，但I(xiàn)PGTT異常，另3只血糖開(kāi)始處于對(duì)照組水平，42d后一直處于高血糖水平。 3.大劑量STZ致高血糖動(dòng)物（9只）的血清胰島素較對(duì)照組顯著減少了66％（實(shí)驗(yàn)1）或92％（實(shí)驗(yàn)2）。未致高血糖動(dòng)物（9只）的血清胰島素變異較大，其中血糖一直處于對(duì)照組水平的6只中，有3只動(dòng)物的血清胰島素接近對(duì)照組水平，另

6、外3只動(dòng)物的血清胰島素介于對(duì)照組和高血糖組之間；以后一直處于高血糖水平的3只動(dòng)物的血清胰島素接近高血糖組水平。 4.大劑量STZ致高血糖動(dòng)物胰腺內(nèi)的胰島受到嚴(yán)重破壞：胰島變小，形狀不規(guī)則，胰島內(nèi)細(xì)胞數(shù)量減少；胰腺切片上胰島輪廓的平均面積較對(duì)照組顯著減少了30％（實(shí)驗(yàn)1）或56％（實(shí)驗(yàn)2），單位面積胰腺切片內(nèi)胰島輪廓的數(shù)量顯著減少了63％（實(shí)驗(yàn)1）或69％（實(shí)驗(yàn)2），胰腺內(nèi)胰島的總體積顯著減少了74％（實(shí)驗(yàn)1）或89％（實(shí)驗(yàn)2）。

7、大劑量STZ未致高血糖動(dòng)物胰腺內(nèi)的胰島也受到不同程度的破壞，其中血糖一直處于對(duì)照組水平的6只中，胰腺內(nèi)大部分胰島看似正常，胰島總體積接近對(duì)照組水平或介于對(duì)照組和高血糖組之間；而在以后血糖一直處于高血糖水平的3只動(dòng)物中，大部分胰島均有破壞，胰島總體積接近高血糖組水平。 結(jié)論： 1.大劑量STZ嚴(yán)重破壞胰島（B細(xì)胞）后，胰島不再恢復(fù)，動(dòng)物將長(zhǎng)期處于高血糖狀態(tài)。大劑量STZ對(duì)少部分動(dòng)物胰島的破壞不夠嚴(yán)重，短期（注射7d后）內(nèi)不