樟子松樹皮多酚的提取、分離純化及結(jié)構(gòu)組分分析.pdf

1、樟子松中含有多糖、黃酮、多酚類物質(zhì)、有機(jī)酸、鞣質(zhì)等豐富的有效成分，具有藥用開發(fā)價(jià)值。樟子松樹皮多酚的提取、分離純化及結(jié)構(gòu)組分分析旨在通過樟子松多酚的提取工藝、純化工藝、成分結(jié)構(gòu)和多酚-蛋白復(fù)合反應(yīng)進(jìn)行較為系統(tǒng)的研究，為多酚的相關(guān)研究奠定基礎(chǔ)，為樟子松的綜合利用和深度開發(fā)提供依據(jù)。具體的研究內(nèi)容如下:
　　1、樟子松樹皮松多酚提取工藝研究。比較有機(jī)溶劑提取法、超聲波輔助提取法和超聲波-復(fù)合酶法對(duì)樟子松樹皮松多酚提取效果的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)

2、果表明，有機(jī)溶劑提取樟子松樹皮中多酚的適宜工藝條件為:乙醇濃度為60％，料液比為1∶25(g/mL)，提取時(shí)間為4h，提取溫度為60℃。超聲波輔助提取樟子松樹皮中多酚適宜工藝條件為:超聲功率為300W，超聲時(shí)間為2.5h，超聲溫度為60℃，溶液pH為3.0。超聲波-復(fù)合酶法提取樟子松樹皮中多酚適宜提取工藝條件為:酶解時(shí)間為40min，酶解溫度為45℃，加酶量為4％，酶解pH為4.0。三種提取方法在最適宜條件下的松多酚得率分別為12.56

3、、23.01、30.12mg/g。超聲波-復(fù)合酶輔助提取法提取時(shí)間最短、提取效率最高，提取效果最好，超聲波輔助提取法次之，二者提取效果均好于有機(jī)溶劑提取法。
　　2、樟子松多酚的純化研究。以吸附率和解析率為衡量指標(biāo)，確定純化樟子松樹皮多酚的最佳樹脂;以多酚純度和回收率為衡量指標(biāo)，研究純化過程中影響較大的因素，并且利用響應(yīng)面優(yōu)化樟子松樹皮多酚的純化工藝。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:選取9種大孔吸附樹脂并分別對(duì)其進(jìn)行靜態(tài)吸附和解吸實(shí)驗(yàn)及動(dòng)態(tài)實(shí)驗(yàn)，最

4、終確定出選取AB-8大孔樹脂進(jìn)行松多酚的純化工藝研究。通過爬坡實(shí)驗(yàn)和響應(yīng)面設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)優(yōu)化出松多酚初級(jí)純化的最佳條件為洗脫劑乙醇濃度51.6％、上樣液濃度2.5mg/mL、上樣液體積28mL、洗脫速率10mL/min、徑高比1∶27.3。利用Sephadex LH-20層析柱對(duì)經(jīng)AB-8大孔吸附樹脂純化所得的松多酚進(jìn)行分離純化，得到二次純化的松多酚，純度為85％。
　　3、樟子松多酚結(jié)構(gòu)分析的研究。采用HPLC、UV-VIS、IR和L

5、C-MS對(duì)多酚化合物成分和結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析鑒定。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:通過紫外吸收光譜分析松多酚在240-280nm、300-400nm這兩個(gè)波長范圍內(nèi)均有吸收峰，可以初步鑒定松多酚中含有黃酮類物質(zhì)。傅里葉變換紅外光譜可以得到松多酚的酚羥基Ar-OH在3400cm-1 v O-H對(duì)稱伸縮振動(dòng)產(chǎn)生強(qiáng)而寬的特征吸收峰以及在1390-1315cm-1的羥基δO-H面內(nèi)彎曲振動(dòng)吸收峰，說明松多酚分子中存在酚羥基，屬于酚類物質(zhì)。液質(zhì)聯(lián)用分析可以推斷52.31

6、7min時(shí)該物質(zhì)可能為芥子酸-葡糖糖苷，63.344min時(shí)可能為芍藥-3-葡萄糖（半乳糖）苷或者矢車菊-3-（6-O-乙?；?葡糖糖（半乳糖）苷，69.963min時(shí)可能為芥子酸芍藥色素-3-槐糖苷。
　　4、樟子松多酚-蛋白復(fù)合反應(yīng)的研究。選取了明膠、牛血清蛋白、大豆分離蛋白三種蛋白質(zhì)分別與多酚進(jìn)行反應(yīng)，研究不同反應(yīng)條件對(duì)多酚-蛋白質(zhì)相互作用的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，多酚-明膠復(fù)合反應(yīng)的適宜條件為:多酚∶明膠=2∶1;溫度為40