人肝癌血管內(nèi)皮細(xì)胞相關(guān)基因的篩選及功能的初步研究.pdf

1、中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文人肝癌血管內(nèi)皮細(xì)胞相關(guān)基因的篩選及功能的初步研究姓名：鐘星申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：免疫學(xué)指導(dǎo)教師：楊治華20040501中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院博士研究生學(xué)位論文內(nèi)皮細(xì)胞中低表達(dá)或不表達(dá)，從而證明了該基因是一個(gè)腫瘤血管內(nèi)皮細(xì)胞上調(diào)基因。采用反義核酸技術(shù)和RNA干擾技術(shù)分析HEC252基因在腫痛血管內(nèi)皮細(xì)胞中的作用，結(jié)果顯示抑制或阻斷該基因的表達(dá)，可抑制人肝癌血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖，抑制率可達(dá)70～80％，其

2、機(jī)制可能與誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡和G2期阻滯有關(guān)；同時(shí)還能抑制血管網(wǎng)的形成。采用抗HEC252基因產(chǎn)物胞外區(qū)的抗體中和或封閉細(xì)胞膜表面HEC252基因產(chǎn)物，結(jié)果顯示該抗體可通過G2期阻滯抑制內(nèi)皮細(xì)胞的增殖和成管。這些結(jié)果在基因和蛋白水平上首次證明該新基因在人肝癌內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、成管中起著重要作用。同時(shí)，采用RNA干擾技術(shù)在本文建立的人肝癌血管形成動(dòng)物模型中分析了HEC252基因在體內(nèi)腫瘤組織中對(duì)入肝癌血管內(nèi)皮細(xì)胞及腫瘤新生血管形成的作用，結(jié)果表明

3、阻斷HEC252基因的表達(dá)能顯著地抑制人肝癌內(nèi)皮細(xì)胞在腫瘤組織中增殖和形成血管，從而有效地抑制腫瘤的生長(zhǎng)，其抑制率可達(dá)7989％，在體內(nèi)證明了該基因在腫瘤內(nèi)皮細(xì)胞的增殖和形成血管中起重要作用。為了研究腫瘤血管內(nèi)皮細(xì)胞相關(guān)基因的體內(nèi)功能，科學(xué)地評(píng)價(jià)抗衄管形成藥物的療效，本文將人肝癌血管內(nèi)皮細(xì)胞分別與多種人腫瘤細(xì)胞混合后共接種于NODSCID小鼠，采用綠色熒光蛋白示蹤技術(shù)、免疫組化、血管密度計(jì)數(shù)及熒光顯微鏡觀察等方法證明了接種的人肝癌血管內(nèi)