虹膜血管緊密連接變化與角膜移植免疫排斥關(guān)系的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:研究虹膜血管緊密連接的變化與角膜移植免疫排斥反應(yīng)之間的關(guān)系，進(jìn)一步揭示角膜移植免疫排斥反應(yīng)的發(fā)生機(jī)理。方法以C57BL/6小鼠為供體，BALB/c小鼠為受體，制作穿透性角膜移植模型40只。其中20只前房植入環(huán)孢素A緩釋系統(tǒng)(CSA-DDS)；為B組，余為A組。應(yīng)用虹膜鋪片技術(shù)、免疫組化技術(shù)及分子生物學(xué)檢查，檢測不同時(shí)間虹膜血管CD31、緊密連接蛋白Z0-1、occludin及金屬基質(zhì)蛋白酶9(MMP-9)的變化。 結(jié)果:虹

2、膜鋪片免疫熒光顯示：A組術(shù)后7天可見CD31陽性血管密度增加，管腔明顯增粗；B組術(shù)后18天，虹膜血管管腔變粗；排斥時(shí)兩組虹膜血管管腔均較正常粗，走形僵直。眼球冰凍切片示：A組術(shù)后7天，B組術(shù)后18天小鼠虹膜緊密連接蛋白Z0-1表達(dá)無明顯變化，MMP-9表達(dá)明顯增加；排斥時(shí)Z0-1的表達(dá)較正常減少，MMP-9表達(dá)明顯增加。RT-PCR檢測發(fā)現(xiàn)：A組術(shù)后3、7、12、18天MMP-9表達(dá)均高于正常；B組3天時(shí)表達(dá)明顯增多后急劇下降，但18天

3、時(shí)又高于正常。A組術(shù)后3天occludin表達(dá)一過性增加，之后逐漸下降，至18天達(dá)最低，B組呈緩慢的下降趨勢。A組術(shù)后3天、12天Z0-1表達(dá)明顯增多，7天、18天時(shí)表達(dá)較正常明顯下降。B組3天明顯高于正常，之后逐漸下降，18天時(shí)表達(dá)與正常無明顯差別。 結(jié)論:角膜移植免疫排斥反應(yīng)發(fā)生時(shí)iris angioedema andcoarsen虹膜血管水腫，管腔變粗，緊密連接蛋白ZO-1、occludin表達(dá)減少，前房植入CSA可延緩這