黃芪藥材及其相關(guān)制劑的指紋圖譜研究.pdf

1、黃芪(Radix Astragali)是豆科植物蒙古黃芪Astragalus membranaceus(Fisch)Bge.Var.mongholicus(Bge.)Hsiao或膜莢黃芪Astragalus membranaceus(Fisch)Bge.的干燥根,其味甘,性溫,是中醫(yī)常用的“益氣藥”,具有益氣升陽(yáng),固表止汗,利水消腫,托毒生肌之功效。作為傳統(tǒng)的補(bǔ)益類中藥,黃芪的應(yīng)用已經(jīng)有數(shù)千年的歷史,具有廣泛的民間基礎(chǔ),而今對(duì)黃芪藥材的

2、二次開(kāi)發(fā)和深入研究已經(jīng)引起了國(guó)內(nèi)外的廣泛關(guān)注。指紋圖譜是一種綜合的、可量化的鑒定手段,能全面反映中藥及其制劑的化學(xué)成分情況。以指紋圖譜作為中藥、提取物及其制劑的質(zhì)量控制方法,目前已經(jīng)成為目前國(guó)際共識(shí),各種符合中藥特色的指紋圖譜控制技術(shù)體系正在研究和建立。本論文建立了黃芪藥材、黃芪總皂苷以及黃芪總皂苷注射液的HPLC/DAD的指紋圖譜質(zhì)量控制方法,并進(jìn)行了指紋圖譜的相關(guān)研究。 黃芪藥材中含有黃酮和皂苷兩大類成分,本研究涉及黃芪藥材

3、、黃芪總皂苷原料、黃芪總皂苷注射液的指紋圖譜研究,且需要考察幾者間的相關(guān)性,加上黃芪藥材中心血管活性成分為皂苷類成分,因此本研究針對(duì)黃芪中皂苷類進(jìn)行指紋圖譜研究。 首先,對(duì)黃芪藥材的前處理?xiàng)l件進(jìn)行考察,比較了不同提取溶劑、提取方法和提取時(shí)間的影響,確定最佳前處理方案為乙醇回流提取30min。其次對(duì)色譜柱、檢測(cè)波長(zhǎng)和參照物進(jìn)行了考察,由于210nm下色譜峰紫外吸收較大,且色譜基線平穩(wěn),確定以IntersilODS-3色譜柱為指紋圖

4、譜分析柱,210nm為檢測(cè)波長(zhǎng)。黃芪甲苷色譜峰在指紋圖譜中所占比例小,色譜峰不明顯,作為參照峰不合適,經(jīng)過(guò)摸索研究,最終確定以斷血流皂苷A作為參照物,并采用自動(dòng)進(jìn)樣器柱前混合進(jìn)樣的方法。再其次建立了10批次甘肅隴西GAP基地產(chǎn)黃芪藥材的HPLC/DAD指紋圖譜,進(jìn)行了包括精密度、穩(wěn)定性、重復(fù)性等內(nèi)容的方法學(xué)考察,確認(rèn)了包括添加的參照物斷血流皂苷A在內(nèi)的8個(gè)共有峰,建立了對(duì)照指紋圖譜,計(jì)算指紋圖譜的相似度。最后建立了黃芪藥材的有效部位提取

5、物——黃芪總皂苷、有效部位制劑黃芪總皂苷注射液的指紋圖譜,為該類原料和制劑的指紋圖譜質(zhì)量控制提供了依據(jù)。 此外,本文還應(yīng)用現(xiàn)代色譜手段對(duì)黃芪總皂苷原料的化學(xué)成分進(jìn)行了系統(tǒng)的分離,并應(yīng)用化學(xué)及光譜學(xué)方法(1H-NMP,13C-NMR,DEPT,1H-1HCOSY,NOESY,HMQC,HMBC,EI-MS,ESI-MS,IR)進(jìn)行了結(jié)構(gòu)鑒定。共得到13個(gè)化合物,經(jīng)光譜和化學(xué)方法鑒定了其中12個(gè)化合物的結(jié)構(gòu)。分別為：AST-1β-谷