不同產(chǎn)地黃芩藥材及其制劑連翹敗毒片的指紋圖譜研究.pdf

1、指紋圖譜是指某種(或某產(chǎn)地)中藥材或中成藥中所共有的、具有特異性的某類或數(shù)類成分的色譜或光譜的圖譜。其特點(diǎn)在于:通過指紋圖譜的特異性,能有效鑒別樣品的真?zhèn)位虍a(chǎn)地；及通過指紋圖譜主要特征峰的含量或比例的制定,能有效控制樣品的質(zhì)量,確保樣品質(zhì)量的相對穩(wěn)定。
　　 因此,在有效成分不完全明確的前提下,特定中藥材或中成藥的特征指紋圖譜,對于有效地控制中藥材或中成藥的質(zhì)量,具有重要的意義。目前指紋圖譜己成為國際公認(rèn)的控制中藥或天然藥物質(zhì)量

2、的最有效手段。
　　 當(dāng)前,國內(nèi)外認(rèn)可和研究較多的為高效液相色譜指紋圖譜,它是現(xiàn)在應(yīng)用最多的一類,具有分離效能高,分析速度快等優(yōu)點(diǎn)。如運(yùn)用DAD檢測器,可得到三維圖譜,因而適用于成分比較復(fù)雜且在紫外光區(qū)有吸收的藥物的分析。其它指紋圖譜技術(shù)的發(fā)展,也將對中藥質(zhì)量控制有深遠(yuǎn)的意義,現(xiàn)僅就中藥材HPLC指紋圖譜做一探討。
　　 黃芩是我國著名的傳統(tǒng)中藥,是唇形科植物黃芩的干燥根。最早收載于《神農(nóng)本草經(jīng)》,列為草根藥的上品。它含

3、黃酮類、谷甾醇、苯甲酸、黃芩酶、淀粉等,其主要有效成份是黃酮類化合物,迄今已分離出約40種黃酮,如黃芩苷、黃芩素、漢黃芩苷、漢黃芩素、白楊素、千層紙素A等。黃芩性寒,味苦歸肺膽胃大腸經(jīng)。具有清熱燥濕、瀉火解毒、止血安胎等功效,可用于濕熱瀉痢、肺熱咳嗽、熱病煩渴、黃疸、目赤腫痛、積熱吐血、胎動(dòng)不安、痛腫瘡癤等癥。它具有多種藥理作用,近年來國際上對黃芩的研究呈上升趨勢。河北是黃芩的道地產(chǎn)區(qū),其藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)顯示其某些療效確實(shí)較好。并以河北承德產(chǎn)

4、黃芩質(zhì)量最佳,被稱為“熱河黃芩”。
　　 連翹敗毒片為傳統(tǒng)的清熱解毒、消腫止痛中藥,臨床主治瘡癤潰爛、灼熱發(fā)燒、流膿流水、丹毒皰疹、疥癬疼癢等癥。近也有報(bào)道其具有抗內(nèi)毒素及提高機(jī)體細(xì)胞免疫、體液免疫的作用。
　　 目的:
　　 1、建立河北省8個(gè)不同產(chǎn)地野生黃芩藥材的指紋圖譜,并進(jìn)一步建立河北省黃芩藥材的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)圖譜體系。
　　 2、建立13個(gè)不同產(chǎn)地黃芩藥材指紋圖譜,分析其共有性和特異性,為鑒定黃芩

5、的種源和質(zhì)量提供依據(jù)。
　　 3、測定不同直徑黃芩藥材黃芩苷含量,分析黃芩苷含量與黃芩直徑的關(guān)系,為鑒定野生黃芩的生長期提供依據(jù)。
　　 4、對黃芩復(fù)方制劑連翹敗毒片做指紋圖譜分析,并檢測黃芩苷的含量,建立其質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。
　　 方法:
　　 1、采用水煎回流提取法對不同產(chǎn)地的黃芩藥材進(jìn)行提取,以四元流動(dòng)相色譜檢測體系,建立各黃芩樣品的HPLC指紋圖譜。
　　 2、采用多指標(biāo)分析,對黃芩多種有效成

6、分進(jìn)行含量檢測,并通過方法學(xué)驗(yàn)證,建立黃芩的質(zhì)量評價(jià)體系。
　　 3、采用居群取樣,對13個(gè)不同產(chǎn)地的每個(gè)產(chǎn)地的10-24個(gè)取樣點(diǎn)的每根黃芩藥材做指紋圖譜分析,采用高相液相色譜法對不同產(chǎn)地黃芩藥材做指紋圖譜鑒別。
　　 4、對黃芩復(fù)方制劑連翹敗毒片采用和黃芩一樣的檢測體系,建立10批樣品的指紋圖譜,并對其黃芩苷成分做含量測定,并通過方法學(xué)驗(yàn)證,建立連翹敗毒片的質(zhì)量評價(jià)體系。
　　 結(jié)果:
　　 1、在黃芩

7、藥材的指紋圖譜中,70分鐘內(nèi)分離出15個(gè)共有指紋峰,其中8號是黃芩苷,12號是漢黃芩苷,13號是黃芩素,14號是漢黃芩素,15號是千層紙素A。
　　 2、8批河北不同產(chǎn)地的黃芩藥材的共有峰的分離度良好,保留時(shí)間穩(wěn)定,重現(xiàn)性好,且在不同種群間相互吻合較好,其對照指紋圖譜按面積歸一化法計(jì)算,15個(gè)共有峰的面積占總峰面積百分比分別為0.076％,0.176％,1.651％,0.941％,0.904％,0.202％,1.063％,60.

8、519％,3.131％,8.986％,13.054％,3.481％,0.105％,2.360％和0.899％。故可作為河北省黃芩的特征指紋。
　　 3、河北圍場城邊山上的黃芩藥材的指紋圖譜在保留時(shí)間4.4分鐘有明顯的指紋峰,峰高與參比峰漢黃芩苷比較大體是1:3,而其它各產(chǎn)地黃芩的指紋圖譜在此保留時(shí)間無信號。
　　 4、黃芩藥材直徑與黃芩苷含量關(guān)系分析結(jié)果證明,隨黃芩藥材直徑的增大,黃芩苷的含量逐漸降低。
　　 5

9、、在連翹敗毒片的指紋圖譜中,70分鐘分離出13個(gè)共有指紋峰,其中8號峰為黃芩苷,其黃芩苷的平均含量是4.36mg／片。
　　 結(jié)論:
　　 1、河北圍場城邊山上的黃芩藥材的指紋圖譜具有一個(gè)特異指紋峰,而其他各產(chǎn)地黃芩藥材指紋圖譜無此峰,僅其它特征峰的峰高比例有明顯差異。
　　 2、隨黃芩藥材直徑的增大,黃芩苷的含量逐漸降低,黃芩苷含量可作為判斷黃芩生長期的一個(gè)因素。
　　 3、本文所建立的連翹敗毒片的指紋